本文是中医论文，本次meta分析结果显示：通过基于meta分析的系统评价显示，黄连－肉桂临床治疗T2DM有很好的疗效及安全性，可以有效的降低临床中T2DM患者的空腹血糖、提高其睡眠质量、改善临床T2DM患者的临床症状和胰岛细胞的功能。2本次实验研究显示：（1）黄连－肉桂可以有效的改善db/db小鼠高血糖状态，降低其空腹胰岛素水平并修复db/db小鼠小肠的肠道屏障功能；（2）黄连－肉桂可以调节db/db小鼠肠道菌群的分别和菌群组成，进而调控血糖；（3）黄连－肉桂可以调控db/db小鼠胆汁酸的代谢情况，胆汁酸与肠道菌群两者相互影响，共同达到调节血糖的目的；（4）黄连－肉桂通过提高db/db小鼠小肠TGR5mRNA及GLP-1mRNA的表达水平，提高TGR5蛋白及GLP-1蛋白含量，发挥调节db/db小鼠血糖的作用；（5）肠道屏障、肠道菌群以及BA/TGR5/GLP-1通路之间关系密切，相辅相成，互相影响，共同起到调控血糖的作用。黄连－肉桂可以调控血糖，其机制可能与黄连－肉桂可以影响肠道屏障功能－肠道菌群－BA/TGR5/GLP-1—系列的信号通路有关。然而，人类的肠道菌群数量庞大，各个菌群之间的关系及对其代谢产物之间的影响错综复杂，又鉴于我们的检测方法有限，无法从精确的从各个方面阐明肠道菌群与各类疾病之间的关系，所以我们目前对肠道菌群与人类健康之间关系的认知可能只是冰山一角，后期需要更加精确的检测手段及更大规模的前瞻性实验，来更深一步的研究和证明肠道菌群与T2DM等各类疾病之间的相互关系和诱发机制
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第一部分文献综述
在人体所必须的九种氨基酸中，有三种支链氨基酸（BCAA）是必须通过食物来获得的，包括亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸。支链氨基酸可以被肠道菌群继续被分解为酚类和吲哚类物质，促进人体中多种维生素的合成及参与胰岛素抵抗的发生已有实验证实，此三种氨基酸血清水平升高是胰岛素抵抗和T2DM患病风险增加的强生物标志物：胰岛素抵抗的发生发展与BCAA的产生有着复杂的关系。BCAA己被证实了可以通过刺激在蛋白质的合成中起着关键作用的激酶复合物－雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、对细胞生长至关重要的激酶－核糖体蛋白S6激酶1（S6K1）以及胰岛素受体底物1（IRS1）的磷酸化19来干扰胰岛素信号，促使胰岛素抵抗的发生：在啮齿类动物实验中也支持了这些发现，通过对其连续的高脂肪摄入，肠道微生物可能导致血浆支链氨基酸水平的增加和胰岛素抵抗。此外，给大鼠喂食高脂肪同时补充支链氨基酸饮食，与高脂肪大鼠一样具有胰岛素抵抗，研究结果证实，在包括高脂肪摄入在内的饮食模式中，支链氨基酸有助于肥胖相关胰岛素抵抗的发展。肠道菌群是近几年研究的新热点，成为从土壤到饮食，从医疗到健康等多个领域研究与治疗的新靶点。人体内的肠道菌群与人体的健康息息相关，当肠道菌群紊乱并失去平衡时，会引发诸多类疾病进而威胁人类健康。T2DM的发生发展与肠道菌群关系密切，并逐渐引起专家们的重视，研究肠道菌群与T2DM之间的关系，有利于早期对T2DM的防治，也可达成通过改善肠道菌群结构来达到治疗T2DM的目的。
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综述二BA/TGR5/GLP-1信号通路与2型糖尿病的研究进展
胆汁酸生理及代谢乳酸杆菌、双歧杆菌等可以加快胆汁酸的代谢，产生游离胆汁酸，导致溶解肠内脂质、再吸收率降低，导致胆汁酸从粪便排泄增加，同时可以调节胆汁酸的两条通路FXR、TGR5在各组织中的作用，改善宿主的代谢。同样，胆汁酸也可以影响肠道菌群的分布，胆汁酸可以通过破坏细菌细胞膜，改变细胞内大分子结构，消灭部分细菌，留下能够耐受胆汁酸的菌。临床研究显示，胰岛素抵抗、肥胖患者总胆汁酸升高，具有降低BSH活性的厚壁菌门増多，而改善胰岛素抵抗的乳酸杆菌减少。行减重术后的肥胖人群的肠道菌群，与正常体重人群更为相似了，厚壁菌门数量明显减少，而耐受胆汁酸的变形菌门增多。人为的改变肠道菌群分布会改变胆汁酸组成谱。研究显示，连续服用一周的万古霉素患者的血浆、粪便中的次级胆汁酸的含量明显降低，这与抗生素可以改变肠道微生物的结构有关。但服用阿莫西林的患者胆汁酸却没有显著变化，说明不同的药物对胆汁酸代谢的影响也不尽相同。另有研究发现，12a－羟基化的胆汁酸会诱导艰难梭菌孢子的萌发。胆汁酸一肠道微生物轴的平衡失调会增加糖脂代谢紊乱的几率胆汁酸Ｇ蛋白偶联受体5（TGR5）与T2DMBA－TGR5－GLP-1是胆汁酸参与糖脂代谢的重要信号通路之一。TGR5是胆汁酸重要的膜受体，胆汁酸TGR5受体结合后可以引起一系列的反应。同时与胆汁酸合成酶CYP7A1相关联，影响胆汁酸的合成进而影响机体的糖脂代谢。同时TGR5又能够促进小肠L细胞分泌GLP-1，进一步影响血糖水平和胰岛素的分泌。GLP-1是一种肠源性激素，有肠促胰岛素之称。GLP-1受体分布于人体的多个组织器官中，与GLP-1结合后发挥着不同的作用。GLP-1的降糖机制与其可以抑制胰岛Ｐ细胞的凋亡、促进胰岛ｐ增值分化，同时可以抑制胰岛ａ细胞分泌胰高血糖素直接参与血糖的调节有关。另一机制GLP-1是可以作用于肝细胞，抑制肝脏细胞的糖异生，増加肝细胞的肝糖原储存，间接的调控机体的血糖水平。除此之外，GLP-1还可以直接作用于作用于平滑肌细胞增加其对葡萄糖的吸收，同时加速脂肪细胞的分解。GLP-1还可以延缓胃蠕动和排空时间，减少食欲，增加饱腹感来间接调控血糖。BA－TGR5－GLP1信号通路和T2DM的发生发展关系密切，机制复杂，其中夹杂了肠道菌群的参与，共同影响着机体能量及糖脂的代谢情况。研究中医药对BA－TGR5－GLP1信号通路的影响来阐释中医药治疗T2DM的机制，可以成为我们今后研究的新方向，为中医药治疗T2DM提供新的作用靶点和证据。
第一部分文献综述..........14
综述一肠道菌群与2型糖尿病相关性的研究进展..........14
综述二BA/TGR5/GLP-1信号通路与2型糖尿病的研究进展..........28
第二部分黄连－肉桂治疗T2DM临床疗效的有效性及安全性分析..........47
前言..........47
第三部分基于数据挖掘赵进喜教授应用黄连－肉桂治疗T2DM的临床经验研究..........66
第四部分基于肠道菌群的黄连－肉桂改善db/db小鼠血糖的实验研究..........82
前言82
实验一黄连－肉桂对db/db小鼠小肠的形态学影响..........847
实验二黄连－肉桂对db/db小鼠肠道菌群的影响..........95
实验三黄连－肉桂对db/db小鼠胆汁酸代谢及其信号通路BA/TGR5/GLP-1的影响..........117
结语.........33
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实验三黄连－肉桂对db/db小鼠胆汁酸代谢及其信号通路BA/TGR5/GLP-1的影响
1实验材料
T2DM属于中医消渴病的范畴，其病名首见与《素问.奇病论》。中医药在治疗消渴病和改善其临床症状方面有着独特的优势，中医认为消渴病的主要病因为体质因素外加饮食失节、情志失调、劳逸失度、药石所伤以及外感邪毒等引起。其主要病机为阴虚为标，燥热为本，且消渴病早期症状多以胃肠结热、肝经郁热、脾胃湿热、痰火中阻等“热”的形式出现，久而久之出现热久伤阴，壮火食气、伤气，临床中的消渴病患者继而表现出口渴多饮、乏力体倦等临床表现。因此，中医治疗消渴病以清热、益气、养阴为基本治法。多项研究显示，黄连－肉桂在治疗T2DM中有很好的作用效果，其机制可能与黄连的主要成分黄连素和肉桂的主要成分肉桂醛能很好的降低血糖和改善胰岛ｐ细胞的功能有关。有研究显示，黄连素、肉桂醛在药代动力学的观察中，两者合用的降糖的效果优于单独使用，可能与两者能够互相促进对方被机体的吸收有关m。黄连－肉桂单独或作为加减方被广泛的应用到临床对T2DM的治疗中，那么黄连－肉桂在临床中对T2DM治疗的效果究竟如何？为解答这一问题，本次研究已“黄连－肉桂”、“交泰丸”、“2型糖尿病”、“糖尿病2型”、“T2DM”等作为主题词，在中文及英文论文库里进行搜索，结合最终的检索文献和研究结果，对黄连－肉桂在临床中治疗T2DM的疗效进行系统评价和meta分析。
主要试剂
2实验方法
数据采用SPSS4.0进行统计分析，计量结果采用均数加减标准差表示。如数据均符合方差同质性且符合正态分布的计量资料，组间差异采用单因素ANOVA分析，具有显著性后，采用LSD法进行多重比较。如不符合方差同质性或正态分布，采用检验。定义P<0.05为差异有统计学意义。本实验研究显示，黄连－肉桂可以促进db/db小鼠胆汁酸中胆酸、鹤去氧胆酸的分泌，降低熊去氧胆酸的分泌。研究显示，不同的胆汁酸对TGR5结合能力也不同，在初级胆汁酸中，胆酸及鹅去氧胆酸对TGR5有较强的结合力。另有研究发现，熊去氧胆酸对胆汁酸法尼醇X受体具有明显的拮抗作用，而研究证实，FXR可以依赖性抑制的GLP-1前体物质生成增加，从而促进葡萄糖刺激的GLP-1生成。同时，此次实验也显示了，黄连－肉桂可以増加db/db小鼠小肠内TGR5mRNA以及GLP-1mRNA的表达，促进db/db小鼠肠内TGR5蛋白和GLP-1蛋白的合成，其效果优于黄连、肉桂单独使用和二甲双胍的作用。黄连－肉桂可以调控db/db小鼠胆汁酸的分泌，通过胆汁酸影响其体内TGR5、GLP-1的合成与分泌，进而达到调控血糖的目的。结合实验一和实验二的研究结果表明，黄连－肉桂可以调控db/db小鼠的血糖，降低其胰岛素抵抗，其机制可能与黄连－肉桂能够影响db/db小鼠肠道菌群的分布，改善db/db小鼠小肠状态修复其屏障功能，同时作用于胆汁酸/TGR5/GLP-1信号通路，调节胆汁酸分泌进而提高TGR5、GLP-1的表达有关。
主要试剂
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结语
4创新点
4.1理论层面
采用meta分析系统评价的方法，对黄连－肉桂临床治疗T2DM患者的有效性及安全性进行分析。研究对象的对照组以基础降糖药和黄连－肉桂为干预手段，实验组以基础降糖药物作为干预手段，避免了其他药物的干扰而导致研究结果的不确定性。目前还很少有对黄连－肉桂临床治疗T2DM的有效性及安全性进行系统评价的研究。本次研究证实了黄连－肉桂临床治疗T2DM的有效性及安全性。
4.2方法层面
此次研究选用了16SRNA高通量测序法检测了db/db小鼠肠道菌群的分别和组成，黄连－肉桂治疗T2DM的临床应用及对基于肠道菌群的BA/TGR5/GLP-1通路影响，并采用了液相色谱LC－mS的方法对db/db小鼠粪便中的胆汁酸代谢进行了研究分析，把肠道菌群与胆汁酸代谢相结合进行研究。从形态学、微生物学、代谢组学以及蛋白表达等多个角度检测研究了黄连－肉桂的降糖机制和作用靶点。
4.3研究思路层面
以经典名方交泰丸的主要组成成分黄连－肉桂为切入点，系统评价了黄连－肉桂治疗T2DM的临床疗效，以此为基础，进一步研究黄连－肉桂在治疗T2DM时的具体临床应用。在分析研究其临床疗效和临床具体应用的背景下，更进一步探讨黄连－肉桂的降糖机制和作用靶点。将疗效－应用－机制三点串联起来作为本次研究的主要支线。
5展望
5.1本次meta分析研究中由于纳入文献的质量有限，此次研究的评价结果需要在更高质量的文献、更多样本的研究中进一步的验证。
5.2此次临床研究中纳入研究的患者病例数相对较少，不能更好、更完整的体现出赵进喜教授临床应用黄连－肉桂治疗T2DM的思路与经验，以后可以在此基础上继续扩大样本数量，以期更完整的总结和传承赵进喜教授的临床经验。
5.3此次临床研究未对用药中的量－效进行分析和评价，药物的用量跟临床疗效密切相关，意义重大。今后的研究中会把量－效结合，更加全面的分析黄连－肉桂治疗T2DM的临床应用。
参考文献（略）
参考文献（略）
