本文是中医论文，二甲苯诱发小鼠耳部炎症的实验证明，貉胆粉可极显著恢复由二甲苯所诱发的小鼠耳肿胀。在高、中剂量时，同剂量的貉胆粉和熊胆粉抗炎作用无明显差异。证明貉胆粉对急性炎症具有良好治疗效果，可与熊胆粉相比。同时，浓度为 0.14g/m L 的貉胆粉对沙门氏菌、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌体外抑制作用较弱，明显弱于同浓度的熊胆粉。貉胆粉的抑菌作用有待进一步研究。1.本文通过来源、性状、显微、理化、红外、UPLC-MS/MS等方法对貉胆做出生药学鉴定。确定貉胆的特征及其鉴别方法。2.本文使用紫外可见分光光度计，对貉胆粉总胆酸含量测定，确定貉胆粉存在较大的开发潜力。3.本文利用HPLC法对貉胆粉中21种氨基酸进行测定，发现貉胆粉共有16种氨基酸，熊胆粉中只有14种氨基酸，熊胆粉含有的氨基酸都可以在貉胆粉中检测到。4.本文采用ICP-MS对貉胆粉和熊胆粉中65种无机元素含量进行测定，发现貉胆粉和熊胆粉均有64种无机元素，貉胆粉中不含镍元素。5.本文通过药理实验证明貉胆粉具有显著抑制二甲苯诱发的小鼠耳肿胀的作用。但貉胆粉抑菌效果不明显。
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前言
如今，随着科技不断进步，现代中医药研发领域发展空间也有了很大提升，以熊胆入药的传统方剂或中药新药的研发也越来越多。由于熊胆的来源性质注定熊胆供不应求，对其中成药的进一步开发、普及形成很大阻碍。为此，寻找熊胆粉的替代品已成为医学相关专业的研究热点。通过检索文献发现，我国历代本草收录记载有的动物胆汁类药材多达31种[13]。许多来源广、成本低、容易获取、产量大的动物胆汁，如牛胆、猪胆、鸡胆、蛇胆、狐狸胆等替代熊胆的对比研究较多，其他动物胆类中药的研究报道却很少，或者并不完整，甚至完全没有。考虑到不同动物胆功能和化学成分均有一定相似性，因此动物胆类药材替代熊胆具有天然优势。深入研究其他动物胆类中药，有望探寻完美替代熊胆的动物胆。牛、猪、羊、兔、鸡和鹅等动物胆研究较多，已明确可以在一定程度上替代熊胆，但并不能完美替代。貉是人工圈养的特种经济动物，在我国已有60年的养殖历史，我国貉养殖虽短，但是已经发展为世界第一养貉大国，占世界总数97%左右，主要分布于黑龙江、吉林、辽宁、河北、山东五省。养殖貉的目的是获取毛皮。我国年产貉皮1610万余张（中国皮革协会毛皮经济动物养殖委员会2016年公布数据）[14]。打皮后的尸体多被整只废弃，意味着每年都要浪费1610万余貉胆胆囊。
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第一章动物胆类中药材鉴定的研究现状
1.1来源（原植物、动物和矿物）鉴定
熊胆来源于脊索动物门哺乳纲熊科动物黑熊SelenarctosthibetanusCuvier经胆囊手术引流获取的胆汁，经干燥而得的干燥品[20]。牛胆来源于脊索动物门哺乳纲牛科动物胆囊或胆汁干燥品，常以胆粉形式使用[21]。狗胆来源于脊索动物门哺乳纲犬科动物狗Canislupusfamiliaris干燥胆[22]。猪胆为来源于脊索动物门哺乳纲猪科动物猪SusscrofadomesticaBrisson.的胆囊和胆汁或其干燥品[23]。羊胆来源于脊索动物门哺乳纲牛科动物山羊CaprahircusL.或绵羊ovisariesL.的胆囊胆汁的干燥品[24]。兔胆来源于脊索动物门哺乳纲兔科动物蒙古兔LepustolaiPallas.或家兔OryctolagucscuniculusdomesticusGmelin.或东北兔LepusmandschuricusRadde.等的胆囊胆汁干燥品[25]。貉胆来源于脊索动物门哺乳纲犬科动物貉Nyctereutesprocyonoides的胆囊胆汁干燥品[26-27]。狐胆来源于脊索动物门哺乳纲犬科动物赤狐Vulpesvulpes、银狐Vulpslagpus、蓝狐Alopexlagopus的胆囊胆汁干燥品[12，28]。鸡胆来源于脊索动物门鸟纲雉科动物鸡GallusdomosticusBrisson的胆汁干燥品[29-30]。鹅胆来源于脊索动物门鸟纲鸭科动物鹅AnserdomesticaGeese的胆囊干燥品[30]。
1.2性状鉴定
羊胆胆囊含有许多由虱状浅棕色微粒构成的东西，其上裹覆半透明物质。新鲜羊胆汁绿色或黄绿色，粘性强，泡沫多，有独特腥味。倒入水中，快速以丝状下下沉，呈浅黄色，溶液较清澈[31]。新鲜兔胆胆囊个体较小，胆囊壁薄，尖椒状或肾形。胆汁墨绿色或绿色，个别淡黄绿色或黄色，粘稠，泡沫多。常规干燥法获得的兔胆粉为片状、块状，硬膏状，难粉碎，断面有光泽，墨绿色。冷冻获得的冻干粉嫩绿色，质疏松，极易吸湿。有腥气，口尝味极苦。手搓粘手，无响声[25]。狐胆胆囊呈长卵形，上细下粗。表皮黑褐色，褶皱且薄。胆汁黑色或黑绿色；干燥胆粉黄棕色，有光泽，易碎[12]。鸡胆胆汁墨绿色，粘性较强，水溶性较高[30]。新鲜的鹅胆呈囊状，鹅胆上部较细，胆汁为深绿色液体。胆囊干燥后呈扁平状，胆囊表皮较厚，淡棕色。微腥，味较苦[30]。
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第三章貉胆粉和熊胆粉中氨基酸成分比较.....................................37
3.1实验材料与仪器.......................................................37
3.2实验方法.............................................................37
3.3结果与分析...........................................................39
3.4讨论.................................................................45
3.5小结.................................................................45
第四章貉胆粉和熊胆粉中无机元素含量比较...................................47
4.1实验材料与仪器.......................................................47
4.2实验方法.............................................................47
4.3结果与分析...........................................................48
4.4讨论.................................................................51
4.5小结.................................................................51
第五章貉胆粉和熊胆粉的抗炎抑菌作用比较...................................53
5.1实验材料与仪器.......................................................53
5.2实验方法.............................................................54
5.3结果与分析...........................................................56
5.4讨论.................................................................57
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第五章貉胆粉和熊胆粉的抗炎抑菌作用比较
5.1实验材料与仪器
貉胆胆汁经干燥箱30℃干燥48h后，取出，敲碎，倒入研钵中，充分研磨，过60目筛，装入自封袋备用。熊胆使用前，使用真空干燥箱30℃干燥2h，取出，充分研磨，过60目筛，装入自封袋备用。沙门氏菌Salmonella、大肠杆菌Escherichiacoli、金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus，由中国农业科学院特产研究所繁殖综合实验室提供。牛黄消炎片，购于吉林大药房，哈尔滨中药六厂有限公司生产。二甲苯（分析纯），北京化工厂。复方新诺明，杭州微生物试剂有限公司。MH（B）培养基，北京索莱宝科科技有限公司。琼脂，生物工程（上海）股份有限公司。蒸馏水，自制。
5.2实验方法
打孔器对定性滤纸打孔制作直径为6mm的圆形滤纸片，121℃高压蒸汽灭菌30min。无菌条件下分组，共5组，每组20个滤纸片，置于1.5mL无菌离心管中，无菌离心管分别标记1-5，分别吸取1.2mL对应1-5溶液，完全浸没滤纸片。冰箱4℃过夜。次日，在无菌条件下，取出上述处理过的滤纸片，分别移入相应的无菌培养皿中，置含滤纸片的无菌培养皿于干燥箱，37℃烘干含药物的滤纸片，即得药敏片。放入4℃冰箱保存备用。首先选取9个平板，平板背面分别标记沙（沙门氏菌）、大（大肠杆菌）和金（金黄色葡萄球菌），以及1-6。分别使用200uL移液枪吸取100uL沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌供试菌菌液，平板上涂布均匀，三次重复。1-5位置对应5种自制药敏片，6对应阳性对照复方新诺明。然后于37℃培养箱中，倒置培养12h，观察并统计抑菌圈。由表 2-5-2 可知，牛黄消炎片、貉胆粉和熊胆粉均可以有效抑制二甲苯诱发的小鼠耳肿胀。抑制作用强弱顺序为牛黄消炎片（41.84%）<熊胆粉高剂量组（31.17%）<貉胆粉高剂量组（27.62%）<貉胆粉中剂量组（17.99%）<熊胆粉中剂量组（16.11%）<熊胆粉低剂量组（11.09%）<貉胆粉低剂量组（3.77%）。 在统计学上，与空白对照组相比，牛黄消炎片组、貉胆粉高、中剂量组、熊胆粉高、中、低剂量组在抑制小鼠耳肿胀的恢复作用，均具有极显著性差异（P<0.01）。貉胆粉和熊胆粉高剂量组抗炎作用无显著性差异（P>0.05）。熊胆粉中、低剂量组和貉胆粉中剂量组抗炎作用上无显著性差异（P>0.05）。仅貉胆粉低剂量组显示对小鼠耳肿胀有恢复作用，但和空白对照组相比，在统计学上无显著性差异。
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结论
1.本文通过来源、性状、显微、理化、红外、UPLC-MS/MS等方法对貉胆做出生药学鉴定。确定貉胆的特征及其鉴别方法。2.本文使用紫外可见分光光度计，对貉胆粉总胆酸含量测定，确定貉胆粉存在较大的开发潜力。3.本文利用HPLC法对貉胆粉中21种氨基酸进行测定，发现貉胆粉共有16种氨基酸，熊胆粉中只有14种氨基酸，熊胆粉含有的氨基酸都可以在貉胆粉中检测到。4.本文采用ICP-MS对貉胆粉和熊胆粉中65种无机元素含量做了测定，发现貉胆粉和熊胆粉都存在64种无机元素，貉胆粉中未发现镍元素。5.本文通过药理实验证明貉胆粉具有显著抑制二甲苯诱发的小鼠耳肿胀的作用。但貉胆粉抑菌效果不明显。
参考文献（略）
