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短梗五加叶抗心肌缺血活性评价及其速溶茶研制

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  • 用途: 硕士毕业论文 Master Thesis
  • 作者:上海论文网
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  • 论文字数:35633
  • 论文编号:
  • 日期:2024-05-09
  • 来源:上海论文网

药学论文哪里有?本论文以短梗五加叶为实验材料,考察了短梗五加叶提取物对ISO诱导的MI大鼠的心电图、心肌三酶、氧化应激指标及组织形态学变化的影响。

第一章 短梗五加叶抗心肌缺血作用研究

1.2 实验方法

1.2.1 短梗五加叶提取物的制备

短梗五加叶水提物(DGWJ-W)的制备:干燥短梗五加叶,粉碎(过20目),称量,用10倍量蒸馏水浸泡12 h,次日煎煮90 min,抽滤后,同条件再次煎煮,合并滤液,减压浓缩至膏状,真空干燥即得,提取率为25.27%。

短梗五加叶醇提物(DGWJ-A)的制备:干燥短梗五加叶,粉碎(过80目),称量,以30倍量60%乙醇浸泡12 h,次日超声辅助提取45 min,超声功率100 w,提取温度55℃,共提取2次,合并滤液,浓缩适量至膏状,真空干燥即得,提取率为36.25%。

1.2.2 分组和给药

将120只SD大鼠随机分为8组(每组♂10只,♀5只),其提取物均用水溶解后按照表1-3中药物和给药剂量预防性灌胃给药,1次/d,连续15天[1]。

1.2.3 ISO诱导急性心肌缺血模型的制备

在第14天、第15天,除了空白对照组外其余各组大鼠均连续灌胃给药短梗五加叶提取物,皮下多点注射ISO 20 mg/kg[1],1次/d,连续2 d,诱导急性MI大鼠模型,空白对照组皮下注射同体积生理盐水。

第二章 基于非靶向代谢组学分析短梗五加叶抗心肌缺血作用

2.1 实验材料与仪器

2.1.1 实验试剂

本实验所用实验试剂见表2-1。

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第三章 短梗五加叶速溶茶制备工艺优化及品质评价

3.1 实验材料与仪器

3.1.1 实验材料

短梗五加鲜叶,产地为吉林省集安市青石镇青石村,经吉林农业大学王英平教授鉴定为短梗五加鲜叶。

3.1.2 实验试剂

本实验所用实验试剂见表3-1。

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3.2 实验方法

3.2.1 短梗五加叶的制备

(1)炒制杀青法:短梗五加鲜叶→清洗→阴凉通风处晾青3 h→阳光下晒青20 min→240℃杀青6 min→60℃炒青5 min→揉捻→90℃烘干2 h。

(2)杀青发酵法:短梗五加鲜叶→清洗→25℃、70%湿度恒温恒湿箱发酵5 h→230℃杀青5 min→揉捻→180℃炒青15 min。

(3)阴干法:短梗五加鲜叶→清洗→自然阴干。

3.2.2 单因素实验

以阴干短梗五加叶为材料,热水浸提法提取,在粉碎度60目、乙醇浓度60%、提取时间60 min、提取温度55℃、提取次数1次条件下,考察料液比1:10 g/m L、1:30 g/mL、1:50 g/mL、1:70 g/mL、1:90 g/mL(1 g短梗五加叶速溶茶添加溶剂量)对短梗五加叶速溶茶得率的影响;在料液比1:30 g/mL、乙醇浓度60%、提取时间60 min、提取温度55℃、提取次数1次条件下,考察粉碎度20目、30目、40目、60目、80目对短梗五加叶速溶茶得率的影响;在料液比1:30 g/mL、粉碎度60目、提取时间60 min、提取温度55℃、提取次数1次条件下,考察乙醇浓度0%、20%、40%、60%、80%对短梗五加叶速溶茶得率的影响;在料液比1:30 g/mL、粉碎度60目、乙醇浓度60%、提取温度55℃、提取次数1次条件下,考察提取时间30 min、45 min、60 min、75 min、90 min对短梗五加叶速溶茶得率的影响;在料液比1:30 g/mL、粉碎度60目、乙醇浓度60%、提取时间60 min、提取次数1次条件下,考察提取温度45℃、55℃、65℃、75℃、85℃对短梗五加叶速溶茶得率的影响;在料液比1:30 g/mL、粉碎度60目、乙醇浓度60%、提取时间60 min、提取温度55℃条件下,考察提取次数1次、2次、3次、4次、5次对短梗五加叶速溶茶得率的影响。8层纱布过滤,提取液浓缩至适量,置于真空冷冻干燥机中,将浓缩液装入托盘中,液体高度大约15 mm左右,置入冷冻机中冷冻到温度-25℃~-40℃左右,真空度10 Pa,干燥24 h~36 h左右,直至样品完全干燥后取出即得短梗五加叶速溶茶粉,以速溶茶得率为评定标准,选出各因素的适宜范围。

结论 

创新点

(1)首次开展了短梗五加叶抗MI活性研究,发现短梗五加叶提取物对MI大鼠心率、心电图、心肌三酶活性、氧化应激指标及心肌组织结构损伤具有影响,确证了短梗五加叶 有显著抗MI作用。

(2)首次利用非靶向代谢组学技术对短梗五加叶抗MI作用机制进行探讨,发现短梗五加叶可显著回调MI所致的13个内源性代谢物的异常改变,抗MI作用机制可能是通过与调控亚油酸代谢、牛磺酸和低牛磺酸代谢和花生四烯酸代谢通路来实现的。

(3)开发制备了一种以短梗五加叶为原料的速溶茶,优化了制备工艺,完成了品质评价,为短梗五加叶的进一步开发利用提供了新思路。

参考文献(略)


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