药学论文哪里有？本研究基于整合ADME、多重药物靶点预测、分子对接和网络药理学等方法研究复方止嗽散对CVA的分子作用机制，为中药多途径、多靶点、协同治疗复杂疾病的分子机制研究提供了方法学借鉴。
1绪论
1.2 CVA的发病机制
咳嗽变异性哮喘与气道重塑、气道炎症和气道高反应等因素有关，其发病机制与典型哮喘相似。
1.2.1气道高反应
Airway Hyper Reactivity,中文名称气道高反应性，简称AHR，在典型哮喘的发生发展中发挥着重要的作用，它通常是指气道在受到寒冷、灰尘、螨虫、雾霾以及特殊气味等刺激后所呈现出的高敏反应。研究发现CVA患者的气道高反应性与典型哮喘比较并没有太大差异，CVA患者的咳嗽主要与AHR所致的气道痉挛有关[4]。研究发现气道平滑肌（Airway Smooth Muscle,ASM）的收缩增加可导致AHR的发生，ASM中存在的收缩蛋白在遇到环境中的各种刺激后使ASM收缩，导致气道痉狭窄，进而加重气道高反应性[5]。
1.2.2气道炎症
CVA的气道炎症是由多种炎症细胞，细胞因子以及炎症介质等共同参与的病理过程。研究发现嗜酸性粒细胞（Eosinophil，EOS）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosisfactor-α，TNF-α）、白介素-6（Interleukin-6，IL-6）以及白介素-10（Interleukin-10，IL-10）等炎症因子均与气道炎症的形成有关，其中以EOS浸润为主的气道炎症是CVA主要的病理特征[6]。CVA患者在受到TNF-α、IL-10等炎症因子刺激后，会促使气道上皮细胞、巨噬细胞等细胞中的诱导型一氧化氮合酶（Inducible nitric oxidesynthase，iNOS)表达增高，而iNOS是气道生成一氧化氮的主要合成酶，大量的一氧化氮可促进炎性介质的分泌，进一步促进氧自由基损伤细胞的形成，导致气道炎症的发生及肺组织的损伤[7]。综上，为了改善气道炎症和减缓咳嗽的目的，可以降低EOS、IL-6、TNF-α和一氧化氮的水平[8]。此外，气道炎症反应还与机体免疫T淋巴细胞有关。在过敏原存在的条件，机体的Th2淋巴细胞被激活，分泌白介素刺激嗜酸性粒细胞产生与聚集；与此同时白介素也会促进B细胞产生IgE免疫球蛋白，刺激嗜酸性粒细胞释放炎症因子，导致症状进一步加重[9-11]。
2材料与方法
2.2止嗽散有效活性成分的ADME筛选
为了从止嗽散复方中获得具有潜在生物活性的化合物，我们运用ADME模型评价药效学和药动学性质。所以，利用口服生物利用度（oral bioavailability，OB），药物的类药性（drug-likeness，DL）和药物的半衰期评价（drug half-life，HL）来对止嗽散复方中的有效活性成分进行筛选。本研究中使用了ADME特性中的三个药代动力学参数筛选模型，它们的具体描述如下：
（1）OB模型的预估
本研究中，我们运用OB模型来进行活性成分的筛选，即OB模型基于805个结构多样的药物和类药物分子，其决定系数(r2)为0.80，测试集的标准估计误差(SEE)为0.31构成的[40]。此外，为了进一步分析止嗽散复方中的活性分子的药理学参数，我们筛选出符合OB≥30%的化合物作为候选化合物[41]。
（2）类药性评估
为了排除止嗽散方中成药性低的化合物，用类药性（DL）评估指数来优化化合物的药代动力学数据[42]。为得到草药化合物的DL值，所有化合物的平均分子性质从Drugbank数据(http://www.drugbank.ca/)[43]中获得。在本研究中，我们将DL≥0.2设置为候选化合物评估的阈值
3研究结果与分析
3.1止嗽散活性成分筛选既然止嗽散是有七味草药组成的，它们中的每一个都包含几十或者甚至几百种的成分，这是有必要的对止嗽散去创建一个成分数据库。因此，理应尽力而为，通过数据挖掘，来获得止嗽散的成分。
所以，为了在止嗽散中筛选出具有较好药代动力学特性的活性成分，运用最能反映化合物关键的ADME特性的OB，DL和HL来筛选潜在的活性成分。根据前面设置的阈值，我们总共得到82个分子。尽管部分化合物的OB、DL和HL值很低，但这些化合物如柚皮素、β-谷甾醇等已有相关文献报道其药理学活性，故入选有效化学成分库，最终筛选出止嗽散的潜在活性成分有97个（活性成分见表1）。
例如，在哮喘小鼠模型中，陈皮中的柚皮素能够缓和气道周围炎症，减弱小鼠气道高反应，通过卵清蛋白诱使的气道重塑可以得到有效抑制，并且使IgE和Th2细胞因子在哮喘小鼠肺泡灌洗液中的总血清中的水平降低[57]。此外，白前中的β-谷甾醇能够预防气道炎症，阻止Th2细胞因子的水平升高，能够有效治疗过敏性哮喘[58]。这些都表明止嗽散具有治疗CVA的作用。
3.2君臣佐使的相配原则
众人周知，任何一种由多种或数十种药材构成的中药配方都不是随机的。相反，中药配方几乎都是基于一些组合规则构造的，其中最著名的是古代中国的“君臣佐使”理论。本研究中，为了生动地描述该理论，如图3所示，紫菀和百部，桔梗和白前，荆芥和陈皮，甘草分别对应于君、陈、佐和使作为在中药复方中对应着不同角色。
中药主辅药理论下，对止嗽散复方中活性成分对CVA治疗作用的分析，得出止嗽散配方符合“君臣佐使”的配伍原则。在疾病的预防和治疗中，君药往往起主导作用，而臣药要么增强君药的功效，要么负责一些伴随疾病的治疗[78]。对于轻微的疾病，佐剂的作用可增强臣药的治疗效果。至于使药，一般采用低剂量，目的是诱导草药对疾病部位的影响，调节不同草药间的相互作用并从体内清除有毒物质，也称为“信使”。该原则显示，配方中的每种草药都有其特定的功能，并在该原则下进行了整体的组织和排列，以产生特定的效果。
紫菀和百部是止嗽散的君药。紫菀是一种传统的中草药，已被用于呼吸系统疾病已有2000多年的历史，并以其良好的疗效在《中国药典》所有版本中都有记录。在临床上，由于具有多种有益的生物活性，紫菀长期以来一直被用作止嗽散配方的主要成分，并且可显着减轻肺水肿，抑制脂多糖产生的炎性细胞因子的释放，有效地减少痰液，缓解咳嗽及其他因素引起的炎症[79-81]。
5总结
本研究基于整合ADME、多重药物靶点预测、分子对接和网络药理学等方法研究复方止嗽散对CVA的分子作用机制，为中药多途径、多靶点、协同治疗复杂疾病的分子机制研究提供了方法学借鉴。共筛出止嗽散治疗CVA的活性成分97个（包括白前苷元C、7,4′-二羟基黄酮、甘草酸、新对叶百部碱和β-谷甾醇）及靶点144个。通过分析蛋白相互作用网络得到MAPK3、TNF、CASP3、EGFR、PTGS2和MMP-9等10个核心靶点。此外，分子对接验证核心靶点中EGFR、PTGS2和MMP-9与其关键化合物有较好结合力。止嗽散治疗CVA的分子机制是止嗽散中主要活性成分对PI3K-Akt、NF-κB和HIF-1等通路的调控，最终达到治疗CVA的效果。然而，本研究仍然具有一定的局限性，今后仍需要对止嗽散中关键成分抗CVA的作用进行验证。
参考文献（略）
