药学论文哪里有?本研究通过GC-MS对比并分析了三种不同溶剂提取的东北山核桃油的脂肪酸组成和含量,发现三种东北山核桃油的脂肪酸组成一致,主要脂肪酸成分为油酸、棕榈酸、硬脂酸、亚油酸、亚麻酸和顺-11-二十碳烯酸。
1 绪论
1.2 植物油的提取方法
随着数些年来的发展,国内外对植物油提取的研究主要围绕着:压榨法、超声波-微波提取法、索氏提取法、水酶法、微波辅助提取法等方法展开,这些提取方法的特点简述如下。
1.2.1 压榨法
压榨法[35]是我国很古老的制油方法,主要是一种物理制取方法,是指通过机械外力的挤压,把油脂从油料中提取出来。油料需要通过破碎和蒸炒等前期处理破坏油料的细胞结构,再通过机械巨大的压力将油脂从细胞空隙中挤压出来,经过滤网过滤分离后就能得到原油。压榨制油的优势在于采用物理方法,操作简便,不需添加其他原料,能适应大多数油料,获得的原油品质和颜色香味均优于其他油料[36]。但缺点是由于机械压榨较为粗略,油料残渣的残留率较高,从而导致出油率和生产效率低下,增加了生产成本与劳动强度[37]。朱晋萱[38]等人在不同温度下对茶叶种子进行预处理,结果表明,适当的热处理能改善茶叶种子的质量。吴克刚[39]等人对花生和芝麻的混合压榨油进行了研究检测,并对其体外抗氧化性进行了初步的研究。
1.2.2 索氏提取法
索氏提取法是国内外公认的提取粗脂肪的的经典方法,也是我国进行粮油分析规定的首选方法[40]。索氏萃取技术是将油料放入索氏泵内,采用溶剂回流和虹吸的原理,将具有类似极性、易溶于油脂的有机溶剂进行连续萃取,然后将油料放入索氏萃取装置内,经过反复的抽提、蒸发、回流、抽提,提取出来的油脂中的可溶性物质在烧瓶中慢慢积累,经过减压蒸发除去有机溶剂,就可以获得粗脂肪[41]。索氏萃取方法具有操作简单、萃取充分、设备简单、操作方便、能根据萃取极性选用各种不同的溶剂。但其萃取效率低、耗时长,只能用于油脂中粗脂肪的萃取与分析。吴修利[42]等人采用索氏提取法以石油醚为提取溶剂得酸枣仁出油率为32.99 %。刘雪芳[43]等采用索氏萃取技术对核桃仁中的油脂进行了研究,结果表明,提取温度对其产率有较大的影响。
3 山核桃油的脂肪酸成分与品质分析
3.1 试验材料与仪器
3.1.1 试验材料
本研究对超声波-微波联合辅助提取法结合碳酸二甲酯提取系统提取的东北山核桃油的脂肪酸组成与品质进行了初步评价。首先通过GC-MS测定并分析了东北山核桃油的脂肪酸组成,对比不同提取溶剂是否会对东北山核桃油的脂肪酸成分产生影响。再测定了东北山核桃油的比重酸值、碘值、皂化值和过氧化值[89],对不同溶剂提取的东北山核桃油进行了初步的评价。又通过测定东北山核桃油的热重变化,分析其热稳定性。最后观察20 d内三种溶剂方法提取东北山核桃油的共轭二烯值和过氧化值,对东北山核桃油的氧化稳定性进行了研究。根据测定结果,可选择出品质更好的东北山核桃油提取溶剂。
4 东北山核桃油的体外生物活性评价
4.1 实验材料与仪器
4.1.1 实验材料
4.2 实验方法
4.2.1 体外抗氧化活性测定
本研究测定了东北山核桃油对DPPH、ABTS和FRAP三种自由基的清除活性,来判断东北山核桃油的抗氧化活性,并且选用脂溶性较好的α-生育酚(VE)作为阳性对照,绘制不同浓度东北山核桃油-甲醇溶液的抗氧化活性曲线图,并计算对应的IC50值,每个样品试验重复三次取平均值。
4.2.1.1 DPPH自由基清除活力
因为在517 nm时,紫外 DPPH的吸光度是最大的,因此,添加一定的抗氧化剂后,吸收量的数值变化可以用来评估它们与清除率之间的关系,从而达到试验的目的。本实验参照 Brand-Williams[103]的实验并稍作改动,将三种提取溶剂提取的东北山核桃油分别用不同体积的乙醇溶液溶解混匀,配制成不同浓度梯度的样品与乙醇的混合溶液,其浓度分别为6.25 mg/mL 、12.5 mg/mL 、25 mg/mL 、50 mg/mL 、100 mg/mL 、200 mg/mL 。分别取2mL 不同浓度梯度的三种东北山核桃油样品混合溶液加入到浓度为0.008%的2 mL 的DPPH-乙醇溶液中。将其完全混匀后在室温避光条件下反应60 min。反应结束后,用紫外-可见分光光度计在波长为517 nm处分别测量不同浓度的混合溶液的吸光度为A1。用2 mL 不同浓度梯度的样品混合溶液加入2 mL的乙醇溶液完全混合后在室温避光条件下反应60 min,在517 nm处分别测其吸光度,测得吸光度值为A2。以2 mL 的乙醇溶液作为A1的样品混合溶液,其他操作与A1相同,测得吸光度值为A0。以α-生育酚作为阳性对照,制得阳性对照溶液浓度梯度与样品相同。
结论
本研究采用超声波-微波联合辅助提取法,优化了东北山核桃油的提取工艺,通过分析其脂肪酸组成与含量以及理化性质,测定了热稳定性与氧化稳定性,并初步探究了其体外抗氧化活性和降脂活性,主要得出了以下结论:
1.使用超声波-微波辅助提取法结合碳酸二甲酯、石油醚和正己烷的提取率分别为54.28±0.44%、32.14±0.28%和52.15±0.42%,结合碳酸二甲酯具有绿色、无毒和安全等优点,后就超声波-微波联合辅助提取法结合碳酸二甲酯对提取工艺进行单因素优化,得到最优结果为提取温度70 ℃、提取时间25 min、辐照功率400 W和液固比7:1 mL/g。根据单因素实验结果设计了响应面法实验进一步优化东北山核桃油的提取工艺,优化后得出的最佳提取工艺参数为:选用提取时间25 min,液固比7:1 mL /g,辐照功率440 W提取东北山核桃油,最佳提取率为58.15±0.08 %。由于碳酸二甲酯所具有的绿色、安全、环保等出色的化学性能,弥补了其他化学溶剂存在的潜在危险,并且这种提取系统提取率也明显高于其他提取方法和溶剂系统,因此其可以进一步的应用于植物油脂的提取。
2. 通过GC-MS对比并分析了三种不同溶剂提取的东北山核桃油的脂肪酸组成和含量,发现三种东北山核桃油的脂肪酸组成一致,主要脂肪酸成分为油酸、棕榈酸、硬脂酸、亚油酸、亚麻酸和顺-11-二十碳烯酸。成分含量没有显著性差异,都含有90 %以上的不饱和脂肪酸,其中人体自身不能合成的油酸含量在65.38-66.16 %之间,更加符合人类健康营养需求。通过测定东北山核桃油的理化性质,使用碳酸二甲酯提取的皂化值、酸值、碘值和过氧化值等理化性质显著优于其他两种溶剂提取的油样。测定东北山核桃油的热稳定性,发现使用三种不同提取溶剂提取出的不同油样的热稳定性没有显著性区别。观察在30 d 内60 ℃条件下加速氧化的东北山核桃油的变化,可以发现使用碳酸二甲酯提取的油样的酸值、过氧化值和共轭二烯值都显著优于其他两种溶剂提取的油样,说明使用碳酸二甲酯提取的油样品质更高,具有更好的稳定性。
参考文献(略)