农学论文哪里有？本研究通过对红阳猕猴桃多糖进行提取、分离纯化及结构表征的初步探究，考察了红阳猕猴桃多糖体外抗氧化及降糖降脂活性及体内对线虫寿命、运动行为、热应激及氧化应激的影响。
1 绪论
1.5 多糖活性及应用的研究进展
多糖是由多种单糖聚合成的天然高分子化合物。近年来研究发现，植物多糖具有保润、吸湿、降糖降脂、免疫调节、抑制肿瘤、抗氧化、抗衰老及抑菌等重要生物活性[26]。
1.5.1 抗氧化活性
多糖的抗氧化活性有助于防止氧化应激并对抗疾病。Cheng[27]等对葱多糖的提取及抗氧化活性进行了研究，结果表明，其对超氧阴离子和羟基自由基具有潜在的清除能力。Chen[28]等对苦瓜硫酸化多糖进行了分离纯化，分离出的三种多糖对超氧阴离子、羟基自由基和DPPH自由基均具有较好的清除能力。Guan[29]等从块茎和黑孢块茎中提取块茎粗多糖(TACP)和块茎粗多糖(TMCP)，对两种多糖组分的抗氧化活性进行了评价，得出TACP和TMCP均能保护猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)免受H2O2氧化损伤，但TACP的抗氧化作用更强。此外，TACP和TMCP可以保护IPEC-J2细胞免受氧化应激，为开发具有潜在实际意义的抗氧化药物提供理论基础。
1.5.2 降糖降脂活性
老龄化通常伴随着心脑血管疾病、糖尿病等慢性疾病发生，给经济、医疗和社会带来巨大负担[30]。糖尿病已成为全球范围内影响人们健康的主要疾病之一，主要表现为高血糖和高脂血症等[31]。虽然医疗市场上有双胍类、磺脲类等降糖药物，但除了有禁忌症、价格昂贵外，长期使用还会产生不良反应甚至毒性[32]。此外，从自然资源中提取的多糖具有广泛的药理作用，多糖由于细胞毒性低，在副作用和长期使用方面可能具有独特的优势[33]。
3 红阳猕猴桃多糖ACP-3-G的结构表征
3.1 材料与仪器
3.1.1 材料及试剂
原材料为第2章红阳猕猴桃粗多糖ACP以及分离纯化获得的组分ACP-3-G。所用试剂均为分析纯（AR）。
3.1.2 仪器及设备
5 红阳猕猴桃多糖降糖降脂活性分析
5.1 实验材料与仪器
5.1.1 材料及试剂
随着我国人口老龄化的升高和人们不合理的饮食及生活方式，患糖尿病的人数每年正以一定的比例增加，且发病年龄开始低龄化。糖尿病是由于胰岛细胞不再分泌足够的胰岛素或人体无法有效利用所产生的胰岛素，导致糖代谢紊乱而发生的一种慢性疾病[92]。然而，目前用于治疗糖尿病的大多数药物都有一些副作用，因此，开发副作用较小的天然药物已成为当前糖尿病研究的重点[93]。近年来，多种植物多糖已被证明具有改善降血糖活性，如改善β细胞功能障碍、抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性、改善糖代谢、增强胰岛素分泌等，且毒副作用低[94-97]。目前，有关于红阳猕猴桃多糖降糖降脂的研究还未见报道，但已有相关研究证明猕猴桃多糖具有降糖降脂的功效[98,99]。因此，对红阳猕猴桃多糖降糖降脂的研究具有显著的研究价值，本实验通过测定红阳猕猴桃多糖ACP和ACP-3-G对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性的抑制作用来探究体外降血糖能力。通过测定红阳猕猴桃多糖对胰脂肪酶抑制能力、胆固醇吸附能力以及模拟体外环境下结合胆酸盐的能力探究其体外降血脂活力，为红阳猕猴桃多糖实现广泛利用提供数据基础，其可作为功能性和营养食品应用的潜在降血糖血脂候选药物。
PNPG（对硝基苯基-α-D-吡喃半乳糖苷）、牛磺胆酸钠、甘胆酸钠、α-淀粉酶、胰脂肪酶、胃蛋白酶购自上海麦克林试剂有限责任公司；阿卡波糖标准品、PNPB（4-硝基苯基丁酸酯）、α-葡萄糖苷酶购自上海源叶生物科技有限公司；冰乙酸、浓硫酸等均为分析纯。
5.2.1 红阳猕猴桃多糖体外降糖活性测定
5.2.1.1 α-葡萄糖甘酶抑制能力测定
红阳猕猴桃多糖对α-葡萄糖甘酶抑制能力的测定参考Wang[100]等方法加以修改。配置红阳猕猴桃多糖样液浓度为：0.25 mg/mL、0.5 mg/mL、1 mg/mL、2 mg/mL及4 mg/mL。将40 μL 1 U/mL的α-葡萄糖甘酶溶液（pH=6.8的磷酸缓盐冲液PBS配制）与40 μL不同浓度的多糖样品溶液于96孔板中混合均匀，37℃反应15 min后，加入20 μL 2.5 mmoL/L的4-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷溶液（PNPG，pH=6.8的磷酸缓盐冲液配制）混匀后37℃反应15 min，再加入150 μL0.2 moL/L的NaCO3溶液终止反应，于405 nm处测得吸光值记为A1。以PBS代替样品测得的吸光度记为A0，以PBS代替α-葡萄糖甘酶溶液测得的吸光度记为A2。以阿卡波糖为阳性对照。
5.2.1.2 α-淀粉酶抑制能力测定
红阳猕猴桃多糖对α-淀粉酶抑制能力的测定参考陈盛宇[101]的方法加以修改。将100 μL 2 U/mL的α-淀粉酶溶液（pH=6.8的磷酸缓盐冲液PBS配制）与200 μL多糖样品溶液混匀，37℃反应15 min后，加入200 μL1 %的淀粉溶液，37℃反应20 min，最后加入500 μL DNS试剂显色，立即沸水浴15 min终止反应，于540 nm波长处测定其吸光度，记为A1；PBS代替多糖样品溶液测得的吸光度记为A0，PBS代替α-淀粉酶溶液测得的吸光度记为A2。以阿卡波糖为阳性对照。α-淀粉酶抑制能力根据公式（1）进行计算。
6 全文总结与展望
6.2 展望
本研究通过对红阳猕猴桃多糖进行提取、分离纯化及结构表征的初步探究，考察了红阳猕猴桃多糖体外抗氧化及降糖降脂活性及体内对线虫寿命、运动行为、热应激及氧化应激的影响。但还存在一些问题需要后续深入研究。
（1）对ACP-3-G的高级结构有待进一步研究。目前，关于红阳猕猴桃多糖的结构特征与各种活性之间的构效关系仅是初步探讨，后续需借助更高级的多糖解析手段来分析红阳猕猴桃多糖的精细结构信息对其进行深入研究。
（2）对红阳猕猴桃多糖抗氧化、降糖降脂活性的研究只停留于初步探究，其抗氧化活性的研究在体内对线虫的研究也只是初步探讨，而降糖降脂活性缺乏体外细胞、动物实验以及临床相关研究，后续应对其作用机制进行深入研究，寻找相关信号通路。探究其药理活性，寻找其物质基础、抗病机制和潜在的保健药物功能，仍是未来研究的基础。
综上所述，为进一步提高红阳猕猴桃多糖的应用价值，应重点研究红阳猕猴桃多糖的潜在生物活性及其作用机制，对功能性食品、药品的开发具有重要的意义，也为食品及医药保健等领域的应用提供数据支撑。
参考文献（略）
