农学论文哪里有？笔者认为菊芋叶片浸提液含有的化合物种类及含量最多且与南方根结线虫二龄幼虫的校正死亡率之间存在正相关的化合物种类及含量最多，使其对南方根结线虫的抑制效果最好；1%菊芋叶片浸提液可以显著抑制番茄根结线虫病害且不影响连作番茄的生长，并且可以明显提高连作番茄的抗性以及改变了土壤微生物群落。
1 前言
1.2 国内外研究动态
1.2.1 根结线虫病害的危害及防治现状
1.2.1.1 根结线虫病害的危害
根结线虫（Meloidogyne）是一种高度专化型的杂食性植物病原线虫，在全球范围内可为害 5000 多种植物[15, 16]，可以导致作物产量大幅度下降，其中茄果类、瓜类、花生、烟草、莴苣、山药等植物受其为害较严重[17, 18]。根结线虫有 80 多个种，南方根结线虫(M. incognita)是其中分布最广、对植物危害最为严重的 4 个常见种之一[19]，在黑龙江、吉林、辽宁为主的我国东北部地区的温室大棚内均有发现，是温室大棚中的线虫优势种[20]。
根结线虫在分类学上是归属于线性动物门下异皮总科的根结线虫属[21]的寄生性线虫。根结线虫需要历经卵、幼虫、成虫才能完成整个生活阶段。根结线虫在二龄幼虫时期开始对寄主植物的根系进行侵染，在植株根部形成瘤状根结，导致植株对其他病虫害的防御能力也降低，在多种病原菌联合侵染的情况下，最终造成巨大的经济损失[22]。
根结线虫的致病机理主要是其二龄幼虫对植株的侧根进行侵染，利用其头部化感器定位到植株根系后，通过口针侵入到植物根尖分生组织，在细胞内迁移找到维管组织并寄生于此[23]，形成巨细胞进而形成大量瘤状物。根结线虫入侵到植物根部后，致使寄主植物的主根和侧根发育不良，进而形成绿豆或小米大小串珠状瘤状物--根结。根结上常产生稀疏细小的新根，新根又被侵染呈现出肿大型根结。由于植株根部发生病变，对养分的吸收、利用均受到了影响，致使寄主植株产量降低[24]，严重时会产生不结实、地上部萎蔫等症状[25]。根结线虫病害在根结线虫侵染初期植株地上部没有明显的发病症状，中期与植株缺素症十分相似，只有在发病严重的后期才会表现出其独特的症状[26, 27]。番茄植株根结线虫病害发病严重且不易控制在很大程度上是因为根结线虫在侵入植株根系时在根系表面留有创口，土壤中其他的病原微生物会通过这些外部创口入侵番茄植株根系，由多种病原造成联合性的混合型病害，使其防控较为不易[28]。
3 结果与分析
3.1 菊芋植株不同部位浸提液对南方根结线虫的影响
3.1.1 菊芋植株不同部位浸提液对南方根结线虫虫卵孵化的影响
如图 3-1 所示，在各个取样时期，菊芋植株不同部位浸提液处理的南方根结线虫虫卵孵化率均显著低于对照，菊芋叶片浸提液处理的南方根结线虫虫卵孵化率最低，显著低于块茎浸提液处理和茎秆浸提液处理，块茎浸提液处理显著低于茎秆浸提液处理（P < 0.05）。 在各个取样时期，菊芋叶片浸提液的相对孵化抑制率最高，其次是块茎浸提液，然后是茎秆浸提液，且各处理间差异显著（P < 0.05）。
4 讨论
4.1 菊芋植株不同部位浸提液对南方根结线虫的影响
植物源防治线虫已有几十年的历史，因化学药剂防治根结线虫对环境及人类健康存在严重的危害，使得利用植物来防控根结线虫病害有极大的发展潜力[60, 112, 113]。研究表明，万寿菊植株不同部位浸提液对根结线虫的抑制效果存在差异[114]。苍耳的茎叶提取物对番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌的抑菌能力明显高于根部提取物[49]。苦楝不同部位的水提取液对南方根结线虫二龄幼虫的抑杀效果有很大的区别，当各处理浓度均为 10%时，苦楝叶片的水提取液处理的致死能力较好[115]。另有研究结果表明，菊科作物菊芋对南方根结线虫的抑杀效果与其部位有关，且菊芋叶片提取物可以显著降低棉铃虫幼虫成蛹率和提高死亡率[116]。本试验研究发现，菊芋种质资源-‘J13’植株不同部位浸提液对南方根结线虫均有显著的抑制效果，但不同部位间存在差异；菊芋植株不同部位浸提液均可以显著降低南方根结线虫的虫卵孵化率和提高二龄幼虫的致死率，其中菊芋叶片浸提液的抑制效果最好，其次是块茎浸提液，茎秆浸提液对南方根结线虫也有显著的抑制效果，但较菊芋叶片浸提液和块茎浸提液而言抑制效果较差。菊芋茎秆浸提液对南方根结线虫的抑制效果不好可能是由于菊芋植株茎部木质化程度较高，有效活性成分较少。
4.2 菊芋植株不同部位浸提液的成分分析
外源添加可以显著减轻植物根结线虫病害的发生，这可能是因为外源添加的物质中含有可以使线虫致死的化合物。有研究表明，同一培养条件下不同小种淡紫拟青霉代谢产物的组分、所含物质种类及含量不同，可能是其对南方根结线虫产生不同抑制效果的原因[42]。野地瓜不同部位的抗氧化能力与各部位所含的抗氧化物质的种类及含量有关[117]。本试验研究发现，菊芋植株不同部位浸提液中所含的化合物种类及含量不同，菊芋叶片浸提液中检测出的化合物种类及含量最多，菊芋植株不同部位浸提液中均检测出了酸类、芳香烃、烷烃、酚类、酯类、醛类、酰胺类、酮类、醌类和硅氧烷类化合物。将菊芋植株不同部位浸提液的组分与南方根结线虫二龄幼虫校正死亡率进行相关性分析发现，菊芋植株不同部位浸提液中与南方根结线虫校正死亡率呈显著相关的化合物种类及浓度不同。其中菊芋叶片浸提液中含有的呈显著正相关的化合物种类最多（共 20 种），浓度最高（化合物峰面积为 7.51×108，占菊芋叶片浸提液检测出化合物的 40.76%），其中 15 种化合物呈极显著正相关，浓度为 4.46×107，高于茎秆浸提液和块茎浸提液；且菊芋茎秆浸提液中含有的与南方根结线虫校正死亡率呈显著负相关的化合物种类最多（含有 9 种）且浓度最高（峰面积为 2.69×108，占菊芋茎秆浸提液检测出化合物的 18.62%），高于菊芋叶片浸提液和块茎浸提液。结合文献分析发现，菊芋植株不同部位浸提液中共发现 4 种在抑菌杀线方面被证明具有较好效果的物质，分别为 Eugenol（丁香酚）[118]、Benzaldehyde, 4-hydroxy-（对羟基苯甲醛）[119]、Longifolenaldehyde（长叶醛）[120]和 Bis(2-ethylhexyl) phthalate（邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯）[121]，菊芋叶片浸提液中检测出可能的抑菌杀线化合物的种类（4 种）及含量（峰面积为 1.34×108）比块茎浸提液和茎秆浸提液中多，此结果与添加菊芋植株不同部位浸提液对南方根结线虫均有显著的抑制效果，但菊芋叶片浸提液的抑制效果最好的现象相符合，但不同部位菊芋植株浸提液中有效成分是哪些、具体是哪种成分起到主导作用尚待仔细研究。本试验的 GC-MS 检测结果显示，菊芋叶片浸提液中的丁香酚含量较高，为酚类化合物，与前人研究发现的菊芋植株中主要的杀虫抑菌活性物质主要为酚类化合物等相符合。虽然对羟基苯甲醛和丁香酚等化合物在抑菌杀线方面已有研究，但其首次在菊芋中被发现。本研究比较了菊芋植株不同部位浸提液中所含的化合物种类及含量，初步筛选出了菊芋植株中存在的 4 种可能具有抑菌杀线效果的化合物。本次试验中没有进行标样的比对分析及生物活性鉴定，但确定了检测出化合物的保留时间，下一步计划对其进行标样的比对分析、层析柱分离、分段 HPLC 分析、生物鉴定等。
5 结论
（1）菊芋植株不同部位浸提液均可以显著抑制南方根结线虫的虫卵孵化和二龄幼虫存活，其抑制效果表现为叶片>块茎>茎秆浸提液，且各部位浸提液间差异显著。
（2）菊芋植株不同部位浸提液中可检测出 60 种化合物，各部位浸提液的组分及含量存在差异，菊芋叶片浸提液中检测出的化合物种类最多（40 种）、含量最高（峰面积为 1.84×109）；菊芋植株不同部位浸提液中与南方根结线虫二龄幼虫的校正死亡率之间存在相关关系的化合物种类及浓度不同，其中菊芋叶片浸提液中含有的呈正相关的化合物种类（20 种）及含量最多（含量为 7.51×108）。
（3）从 5 种添加浓度的菊芋叶片浸提液中初步筛选出 0.5%和 1%的添加浓度对连作番茄的后续生长进行复筛，发现 1%浓度的菊芋叶片浸提液能够明显减轻根结线虫病害且不影响番茄生长。
（4）菊芋叶片浸提液处理显著增加了接种根结线虫后连作番茄根系防御酶 SOD、PPO、POD 和 PAL 活性，显著增加了总酚和木质素含量，并降低了连作番茄根系 MDA 含量。
（5）菊芋叶片浸提液处理提高了连作番茄根际土壤真菌的丰富度，添加后期显著增加了真菌的多样性；添加菊芋叶片浸提液明显改变了土壤微生物的群落结构。将土壤微生物与土壤虫口密度进行相关性分析发现，细菌的 OTU2631（Bacillus）、OTU2277（Bacillus）和真菌OTU994（Mortierella）与土壤虫口密度呈极显著正相关，且添加菊芋叶片浸提液降低了细菌OTU2631（Bacillus）、OTU2277（Bacillus）和真菌 OTU994（Mortierella）的相对丰度。
综上所述，菊芋叶片浸提液含有的化合物种类及含量最多且与南方根结线虫二龄幼虫的校正死亡率之间存在正相关的化合物种类及含量最多，使其对南方根结线虫的抑制效果最好；1%菊芋叶片浸提液可以显著抑制番茄根结线虫病害且不影响连作番茄的生长，并且可以明显提高连作番茄的抗性以及改变了土壤微生物群落。
参考文献（略）
