医学论文哪里有？本研究发现在巨噬细胞迁移炎症模型中RNF20和H2Bub蛋白表达量减少，且两者呈正相关，RNF20调控的H2Bub作为AS的保护因素，参与AS的发生发展。
材料及方法
一、实验材料
（一）实验细胞RAW264.7小鼠巨噬细胞系购自中国丰晖生物技术有限公司。
细胞培养：将细胞培养在配置好的DMEM培养基中，置于37℃，CO2浓度为5%的细胞敷育箱中，用传代至8-10代小鼠巨噬细胞进行后续实验操作。
（二）实验仪器及试剂
表1主要仪器
实验结果
一、ox-LDL刺激的巨噬细胞中，TNF-α、IL-1β及NF-κB蛋白高表达，巨噬细胞迁移数目增加。
与空白对照组比，ox-LDL处理组中TNF-α、IL-1β及NF-κB蛋白相对表达增加，巨噬细胞迁移数目增加，具有明显的统计学差异（P＜0.01）（见图1，表7）。
图1空白对照组与ox-LDL处理组的TNF-α、IL-1β及NF-κB蛋白相对表达量的WB条带、柱状图、巨噬迁移图片及其柱状图。a.空白对照组与ox-LDL处理组TNF-α、IL-1β及NF-κB蛋白相对表达量的WB条带；b.空白对照组与ox-LDL处理组TNF-α、IL-1β及NF-κB蛋白相对表达量的柱状图；c.空白对照组与ox-LDL处理组巨噬细胞迁移图片；d.空白对照组与ox-LDL处理组巨噬细胞迁移数目柱状图。注：与空白对照组相比，*P＜0.05,**P＜0.01。
二、巨噬细胞炎症迁移模型中，RNF20、H2Bub蛋白低表达，两者呈正相关。
与空白对照组比，ox-LDL处理组中RNF20、H2Bub蛋白相对表达量降低，具有明显的统计学差异（P＜0.01），ox-LDL处理组中RNF20与H2Bub蛋白相对表达量呈正相关，Pearson r=0.7579，P=0.032，（见图2，表7）。
图2空白对照组与ox-LDL处理组的RNF20和H2Bub蛋白表达量的WB条带及柱状图。a.空白对照组与ox-LDL处理组RNF20和H2Bub蛋白表达量的WB条带；b.空白对照组与ox-LDL处理组RNF20和H2Bub蛋白表达量的柱状图；c.ox-LDL处理组RNF20与H2Bub蛋白相对表达量相关性分析，Pearson r=0.7579，P=0.032。注：与空白对照组相比，*P＜0.05,**P＜0.01。
讨论
心血管和脑血管等疾病的发病的主要原因就是AS[20]，其导致的心绞痛、心梗、脑栓塞及脑出血等并发症，对人们的生命造成了极大的威胁[21-23]。因此积极寻找有效的预防和治疗AS的方法，对我们来说有重大的社会效益。大量实验研究结果表明，AS的发生发展不但与脂质沉积和炎型反应等因素相关，基因表观遗传学对其的调控也逐渐成为了人们关注的新的领域，并受到了人们的广泛研究[24]。本实验在oxLDL刺激的巨噬细胞迁移炎症模型中，研究基因表观遗传学对AS的作用机制，为AS的研究及防治提供了新的思路。
AS相关炎症反应主要使由促炎细胞因子、炎症信号通路、具有生物活性的脂质以及一些粘附分子介导的[25]。巨噬细胞能够吞噬脂质并促进炎性反应，在AS斑块形成过程中起到的极其重要的作用[26]。本实验研究发现，在使用oxLDL刺激巨噬细胞后，oxLDL处理组中TNF-α、IL-1β及NF-κB等炎性因子蛋白表达量明显增加，巨噬细胞迁移数量也明显增加，这说明使用oxLDL刺激巨噬细胞可以模拟AS的过程。
此外，本研究发现，在oxLDL刺激的巨噬细胞中，RNF20和H2Bub蛋白表达降低，且两者呈正相关。这说明RNF20调控的H2Bub可能是通过基因表观遗传学发挥作用，进而影响巨噬细胞迁移及炎症反应的过程，有研究表明，在一些慢性炎性癌症疾病中，RNF20及H2Bub得表达量降低是启动基因组不稳定性的关键因素[27]，如在乳腺癌和肺癌中RNF20和H2Bub的表达量都是降低的[28,29]。这些研究成果与本实验所得到的结果相似。这说明组蛋白泛素化的水平可能与炎症反应之间存在相关性，进一步说明了基因表观遗传学中的组蛋白泛素化修饰可能参与AS中的炎性反应的调控。但组蛋白泛素化在AS中的作用研究甚少，有待我们进一步探究。
本研究创新性的自我评价
本研究使用ox-LDL作用于小鼠RAW264.7巨噬细胞模拟巨噬细胞迁移炎症模型，采用功能获得实验（oe-RNF20转染巨噬细胞）观察RNF20对H2Bub表达及巨噬细胞炎症迁移的作用，阐明RNF20调控的H2Bub在AS进展中的作用。并在ox-LDL作用的小鼠巨噬细胞中加入NF-κB信号通路的兴奋剂及抑制剂，进一步探讨RNF20调控的H2Bub经过NF-κB信号通路对AS的影响。RNF20是组蛋白泛素化酶，可以增加组蛋白H2B泛素化修饰水平，通过基因表观遗传学的调控影响巨噬细胞的炎症迁移反应，从而干预AS的发展进程，NF-κB信号通路在此过程中发挥了重要作用。本研究阐明了RNF20调控的H2Bub在AS的发展的机制，并进一步说明了基因表观遗传学在AS的发展作用，为AS的早期检测和防治开辟了新的研究方向。
参考文献（略）
