医学论文哪里有?本文鉴定了不同产地的紫苏挥发油成分,其中香芹酮、2-乙酰基呋喃、紫苏醛、β-石竹烯、β-细辛脑和柠檬烯为主要成分,并通过触杀活性测试,优选出紫苏-1挥发油进一步分离鉴定。
第一章前言
1.2紫苏化学成分及生物活性研究进展
紫苏属于唇形科紫苏属一年生草本植物,主要种植在亚洲(Hu et al.2014)。紫苏有紫叶和绿叶两种,分别被称为紫苏和白苏,两者在形态和化学方面存在显著差异(Youet al.2014)。中国是紫苏种植的发源地,紫苏在我国种植近两千多年,为卫生部规定的药食两用作物之一。紫苏在我国分布范围较广、资源丰富,集中在东北、安徽、川贵等地,基于其较高的营养价值和药用价值,成为了全球关注的经济植物之一(于海鑫2019;周勤梅等2019)。自古以来就有紫苏防蛀应用的记载,元朝《王祯农书》提到“苏,桂荏,六畜所不犯,类能全身远害者,于五谷有外护之功,于人有灯油之用”。此外,人们将紫苏作为一种药材加以应用,并对其进行了深入的研究。紫苏药理作用广泛,其作为药用有显著的镇痛解热、抗菌消炎、抗过敏、抗癌作用,其入药部分包括紫苏叶、紫苏梗、紫苏籽(Radácsi et al.2016;沈奇等2017)。紫苏在食品、保健等领域也有广泛用途,紫苏叶和紫苏籽有独特的香气,具有很高的食用价值,同时可在保健品领域应用(沈奇等2017)。
1.2.1紫苏化学成分研究
目前在紫苏的种子、茎和叶中分离出了271种不同的植物化合物,根据化学性质,紫苏中的活性化合物可分为萜类化合物、酚类化合物、黄酮类化合物、挥发性化合物和花色苷类化合物(Ahmed 2018;Garima et al.2016)。
1.2.1.1萜类成分
紫苏中含有丰富的萜类成分。单萜类主要有紫苏醛、紫苏烯、芳樟醇,其中紫苏醛是紫苏挥发油中含量较高的单萜成分(周勤梅等2019)。此外,Chen等(Chen et al.2003)测定出紫苏中的三萜类化合物,包括委陵菜酸、齐墩果酸和熊果酸。类胡萝卜素是一类有机色素在叶绿体中积累,属于四萜类,紫苏中类胡萝卜素的含量较高,比其他富含类胡萝卜素的蔬菜高5倍(Muller-Waldeck et al.2010)。
第三章紫苏挥发油的成分分离及单体成分活性评价
3.2实验方法
3.2.1紫苏挥发油化学成分分离鉴定
取5 mL 紫苏挥发油,湿法上样,采用硅胶(160-200目)柱层析,依次经石油醚、石油醚:乙酸乙酯(50:1和20:1)、乙酸乙酯梯度洗脱,经薄层色谱法检测后,合并相同组分,再经硅胶柱(160-200目)色谱进一步分离、纯化和重结晶,最后得到单体化合物。分离过程见图3-1。采用核磁1H-NMR和13C-NMR谱对分离得到的化合物进行鉴定。
第五章紫苏活性成分对赤拟谷盗的杀虫作用机制研究
5.1实验材料
5.2实验方法
5.2.1样品处理
以赤拟谷盗为靶标昆虫,依据前期活性成分LD50结果,以正己烷为溶剂分别制备3组样品溶液。依据“2.2.4触杀活性测试”实验方法处理试虫,正己烷作为空白对照。每个样品处理90只试虫,设3次重复,置于恒温培养箱中继续培养。
5.2.2总RNA提取
处理24 h后分别收集30只试虫,在液氮中速冻。将速冻的试虫用DNase/RNase-Free水洗净并称重后,依照总RNA提取试剂盒提取供试昆虫总RNA。
(1)将收集的试虫在冷冻研磨仪中磨碎。每50-100 mg试虫加1 mL裂解液RZ,用冷冻研磨仪进行匀浆处理。(2)将匀浆样品在15-30℃放置5 min,使得核酸蛋白复合物完全分离。(3)4℃12000rpm离心5 min,取上清,转入一个新的无RNase的离心管中。(4)加入200μL氯仿,盖好管盖,剧烈振荡15 s,室温放置3 min。(5)4℃12000rpm离心10 min,样品会分成三层:黄色的有机相,中间层和无色的水相,RNA主要在水相中,水相的体积约为所用裂解液RZ试剂的50%。把水相转移到新管中,进行下一步操作。(6)缓慢加入0.5倍体积无水乙醇,混匀。将得到溶液和沉淀一起转入吸附柱CR3中,4℃12000rpm离心30 s,若一次不能将全部溶液和混合物加入吸附柱CR3,分两次转入吸附柱CR3中,4℃12000rpm离心30 s,弃掉收集管中的废液。(7)向吸附柱CR3中加入500μL去蛋白液RD,4℃12000rpm离心30 s,弃废液,将CR3放入收集管中。(8)向吸附柱CR3中加入500μL漂洗液RW,室温静置2 min,4℃12000rpm离心30 s,弃废液。(9)重复操作步骤8。(10)将吸附柱放入2 mL收集管中,4℃12000rpm离心2 min,去除残余液体。(11)将吸附柱CR3转入一个新的1.5 mL离心管中,加50μL RNase-Free ddH2O,室温放置2 min,4℃12000rpm离心2 min,即得到RNA。
第六章总结
本文以资源丰富且具有多种药理作用的植物紫苏作为研究对象。采用柱层析、核磁共振、气相质谱等先进技术对紫苏挥发油进行化学成分的分离与鉴定,为植物源抗虫制剂的开发提供物质基础。同时以赤拟谷盗为靶标昆虫,对紫苏挥发油与分离得到化学成分进行了触杀和驱避活性评价,筛选出紫苏中具有显著抗虫活性的成分。通过对紫苏中有潜力的抗虫活性物质之间的复配,进一步研究复配的协同和拮抗作用,以期获得防治仓储害虫赤拟谷盗的最佳防效。为弥补紫苏活性成分在杀虫作用机理方面研究不足的缺点,利用转录组技术初步对紫苏组分防治仓储害虫的杀虫作用机制进行探讨。通过本课题的研究,得出了以下结论:
1.本文鉴定了不同产地的紫苏挥发油成分,其中香芹酮、2-乙酰基呋喃、紫苏醛、β-石竹烯、β-细辛脑和柠檬烯为主要成分,并通过触杀活性测试,优选出紫苏-1挥发油进一步分离鉴定。
2.本文成功从紫苏挥发油中分离得到4种化合物,为后续抗虫活性的研究工作提供了物质基础。评价了紫苏挥发油4种化合物对仓储害虫赤拟谷盗的抗虫活性,结果表明紫苏4种化学成分均对赤拟谷盗具有一定的触杀和驱避活性,其中,紫苏醛的触杀和驱避活性最为显著。
3.本文所选不同比例的香芹酮与紫苏醛复配后,均表现出协同作用,其中香芹酮与紫苏醛比例为4:1增效作用最为显著,说明紫苏醛和香芹酮复配可增强对赤拟谷盗的防效作用。
参考文献(略)