口腔医学论文哪里有？本研究证实，沙利霉素可以有效逆转 KB/V 耐药人口腔癌细胞对于长春新碱的耐药性。同时，沙利霉素对于 KB/V 细胞的迁移、侵袭能力亦有显著的削弱能力。此外，沙利霉素似乎是通过抑制 ABC 转运蛋白、逆转 G2/M期阻滞以及上调细胞活性氧水平来实现逆转肿瘤耐药性的。综上所述，沙利霉素可作为临床辅助用药，提高肿瘤对药物的敏感性，是一种有前景的抗癌药物。
第 1 章 绪论
1.2 研究现状
化疗过程中肿瘤细胞产生的耐药性，是临床中的一大挑战。产生耐药性的肿瘤细胞，不仅对放、化疗有更强的抵抗力，其增殖、侵袭的能力也随之上升。临床上通常使用多药联用的方法，来克服细胞对于单一药物的耐药性。然而，多药耐药细胞的出现，削弱了这种策略的收益。
近年来，随着对沙利霉素研究的不断深入，研究者们发现了它的抗癌作用。与传统抗癌药物相比，沙利霉素除了具有靶向性更强、毒性更小、对癌症干细胞针对性更好的优点之外[26]，还具有削弱肿瘤对于化疗药物耐受性的功效。因此，学术界认为，沙利霉素作为单分子多靶标的抗癌化合物，与其他药物联合应用于逆转肿瘤耐药性，具有巨大的研究潜力。然而，沙利霉素对于耐药口腔鳞癌的作用还少见报道。本研究旨在研究沙利霉素对耐药口腔癌细胞的影响，通过评估沙利霉素处理前后，肿瘤细胞增殖能力、转移能力、侵袭能力、耐药性的改变，探究可能的分子机制，为沙利霉素在临床上的应用提供理论指导。
第 3 章 实验方法
3.3 细胞传代
1) 显微镜下观察 KB/V 细胞的生长情况，当细胞的融合率达 80%~90%时，可进行 1：3 传代培养；
2) 弃去瓶中培养基，向培养瓶中加入 1~3ml PBS 清洗 1~2 次，向瓶中加入1ml 胰蛋白酶后放入细胞培养箱中消化细胞；
3) 3~7min 后，显微镜下观察，待细胞触角消失变圆变亮，细胞间隙变大时，加入 1ml 完全培养基终止消化；
4）按照九点法吹打瓶中细胞成单细胞悬液，再将细胞悬液转移至 15ml 离心管中，室温，1000r/min 离心 5 min，弃上清；
5）向离心管中加入 9ml 完全培养基重悬细胞，将细胞悬液均匀分到三个培养瓶中，使用记号笔在培养瓶上标记好传代日期放入培养箱中继续培养。
第 4 章 结果
4.1 沙利霉素增强长春新碱对人口腔癌耐药细胞
KB/V 的细胞毒性作用 通过 CCK-8 细胞增殖实验检测 VCR 对 KB/V 细胞的生长抑制作用以及 SAL与 VCR 序贯合用对 KB/V 细胞的生长抑制作用，结果显示：VCR 单独作用组当VCR 的浓度达到 200nM 时细胞生存率与未加药对照组显示出显著差异而 VCR与 SAL 合用组在 VCR 浓度为 2n M 时即与对照组显示出显著差异（图 1）。对比VCR 浓度为 400nM 时两组的细胞生存率， VCR 单独作用组的生存率为75.25±1.99 而 VCR 与 SAL 合用组的生存率显著低于 VCR 单独作用组仅为28.57±0.97。（Mean±SD）
4.2 沙利霉素对 KB/V 细胞侵袭和迁移的影响
采用划痕实验和 Transwell 实验检测沙利霉素对 KB/V 细胞侵袭和迁移能力的影响。显微镜下观察穿过聚碳酸酯膜的细胞（图 2A），发现 4μM SAL 作用组和 8μM SAL 作用组穿透聚碳酸酯膜的细胞数均少于对照组，且 8μM SAL 组穿透聚碳酸酯膜的细胞数要少于 4μM SAL 组，通过计算与对照组相比 4μM SAL 作用组和 8μM SAL 作用组的相对细胞侵袭率发现（图 2B），4μM SAL 作用于 KB/V细胞时细胞迁移率为对照组细胞迁移率的 37.23%±3.87，8μM SAL 作用组细胞迁移率为对照组细胞迁移率的 18.18%±1.97。（Mean±SD）
第 5 章 讨论
长春新碱（VCR）是一种来自长春花的植物提取物，由于其能作用于肿瘤细胞微管，阻止细胞有丝分裂，被广泛应用于治疗多种癌症[27, 28]。然而，尽管长春新碱的抗肿瘤作用在实验室中被反复验证，但具体的化疗效果却常常受到肿瘤的获得性耐药以及患者复发等因素的限制。当肿瘤耐药发生时，提高长春新碱用药浓度，可能会诱发严重的胃肠道中毒症状[29]。因此，临床上治疗口腔癌时，常将 VCR 与其他药物或生物活性材料联用，以针对产生了单一耐药性的肿瘤细胞。但是，这种方法对于具有多药耐药性的肿瘤，效果欠佳。在对抗肿瘤药物的探索中，一些药物被证明可以逆转肿瘤耐药性，增加肿瘤对放疗和化疗的敏感性。使用这些药物作为化疗辅助用药，能显著改善肿瘤预后。
沙利霉素（SAL）是一种羧基聚醚类钾离子载体抗生素，曾广泛用于畜牧业。近年的研究证实，SAL 对乳腺癌[14, 30]、前列腺癌[31]、结直肠癌[32]、肝癌[33]都有良好的抑制作用。SAL 可以通过抑制 P-gp 蛋白活性的方式，逆转人白血病干细胞的多药耐药性[34]。然而，SAL 对于耐药口腔癌细胞的影响还未见报道。因此，本研究提出假设：SAL 可逆转口腔癌的耐药性，并探寻可能的相关分子机制，为临床用药提供理论指导。
本研究使用 VCR 单独作用于耐药细胞系 KB/V 细胞，CCK-8 评价细胞生存率（图 1），当 VCR 浓度在 1-100nM 范围内时，对肿瘤细胞的存活无显著影响。当 VCR 浓度大于等于 200nM 时，KB/V 细胞存活率出现下降。当使用 SAL 进行提前孵育时，2nM 的 VCR 即可引起 KB/V 存活率的下调，且当 VCR 浓度达到 200nM 时，近半数的肿瘤细胞死亡。这证明了 SAL 能够提高耐药口腔癌对于VCR 的敏感性。
参考文献（略）
