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实验条件下鹿茸治疗三种动物疾病疗效观察

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  • 用途: 硕士毕业论文 Master Thesis
  • 作者:上海论文网
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  • 论文字数:25855
  • 论文编号:el2022010121274928071
  • 日期:2022-01-01
  • 来源:上海论文网

动物医学论文哪里有?本实验选用苯甲酸雌二醇联合黄体酮,通过肌肉注射的方法建立动物模型。在建模成功后使用鹿角盘治疗。结果显示大鼠乳腺增生动物模型建立成功,鹿角盘在其治疗方面疗效显著。


第一章 三种动物模型


1.1 肝纤维化动物模型

1.1.1 肝纤维化的发生

肝纤维化是一个病理生理过程,肝内的结缔组织发生异常的增生是该病的重要表现形式,肝纤维化的发生可由各类致病因子所导致[13]。每个肝脏损伤的修复阶段都离不开肝纤维化这一过程,如果肝脏疾病长时间没有治愈就会导致肝硬化的发生[14]。因此肝纤维化并不是一个单一的疾病,每种肝脏疾病都会经历肝纤维化,是慢性肝脏疾病发展到肝硬化乃至肝癌的必经之路[15]。肝纤维化疾病有很多病因[16],其主要有感染性的,先天性的代谢缺陷以及接触某些化学毒物等都会引起这一疾病,其中病毒性肝炎、自身免疫性肝病、遗传和代谢疾病、肝脏淤血等在动物中都比较常见,各种营养及内分泌障碍,各种病毒、细菌、寄生虫感染,还有各种有毒物质等都会引起动物的肝纤维化[17,18]。肝脏发生肝纤维化其实也是保护肝脏的一种手段。肝纤维化可以限制炎症的区域,这个时期肝脏会对肝纤维化进行修复,此时引起肝脏损伤的因素被消除,肝脏便能回复正常,可是没有合理地消除引起疾病的因素,就会导致肝脏的进一步恶化,发展成肝硬化或者可怕的肝癌。综上所述肝纤维化的治疗十分有意义,治疗肝脏疾病首选的就是治疗肝纤维化,因此治疗肝纤维化重中之重,肝纤维化时期治疗肝病,应当好好把握这一环节。

1.1.2 肝纤维化的研究进展

为解决肝纤维化疾病,夏海珊、陈少茹等探究了肝纤维化的致病机制以及药物治疗现状,验证了甘草次酸具有一定的疗效,但治机理尚不明确[19];张沙沙、张旭在探究肝纤维化机制时总结出肝纤维化并不是独立的疾病,各种肝脏的疾病都有可能导致肝纤维化,肝纤维化复杂的病理过程也为肝纤维化的治疗提供了诸多途径[20];治疗动物疾病首先做的就是要有合理的动物模型,建立成功的动物模型至关重要。朱建忠、刘冀等通过对大鼠经皮下注射 CCl4 结合饮用乙醇制作肝硬化模型[21];王建清选用经腹腔单次注射 CC14,并对建模后的大鼠肝脏多类指标进行检测,上述两种方法建立了成功的动物模型。本实验采用肌肉注射 CC14 的方法复制肝纤维化动物模型[22]。CC14 是一种剧毒类药物可通过机体的吸收进入血液循环,再进入体循环进入肝脏组织,侵害肝脏,由于其具有亲肝的特性,使得当动物受到这种毒物危害时,只是肝脏受到损伤,其他系统尚不受其危害。CC14 通过其代谢产物三氯甲烷自由基破环了细胞膜上的磷脂双分子层,改变细胞的结构与功能。应用CC14 可以导致急性肝脏损伤,进而演变成肝纤维化,长期使用可以导致肝硬化,这些病症的发生主要与 CC14 诱导时间有关[23]。


第二章 乳腺增生动物模型及鹿角盘水提物的治疗


2.1 材料与方法

2.1.2 方法

1 乳腺增生动物模型建立方法

(1) 分组方法:购买 30 只体重为 220g 左右的 SD 母鼠。将 30 只 SD 大鼠随机分为 2组,分别为正常组 10 只,乳腺增生症模型组 20 只,每组进行随机编号,见表 2-3。

(2) 建模方法:两组模型组(HMG+NS)均肌肉注射苯甲酸雌二醇 28 天,0.5mg/kg/d,转为注射黄体酮 7 天,5mg/kg/d,建立动物模型;正常组(Normal)肌肉注射生理盐水(normal saline, NS),1ml。一周一次用游标卡尺精准测量其第二对乳头的高度,直径外观观察建模情况,见表 2-3。

(3) 标本的采集及检测:大鼠最后一次给药 24  h 后腹腔麻醉大鼠,给药 35 天之后在每组模型组中随机抽取四只解剖,取乳腺组织进行组织学,检查其建模情况。将麻醉好的大鼠仰卧在操作台上,用推子去除掉胸腹毛发,沿腹中线从腹腔侧剪至颈部,剥开皮肤,取两侧第二对乳头下乳腺组织。剪切一块乳腺组织,放入多聚甲醛中固定,以用于后期制成石蜡切片,在显微镜下观察 HE 染色后各组大鼠乳腺组织形态学变化,观看腺泡的数量,小叶的结构是否发生增生现象,导管是否有扩张现象,以及其细胞厚度的变化,观看乳腺组织中有无分泌物,分泌物的多少情况。剩余乳腺组织放入 EP 管中编辑好日期和组别,放入液氮中迅速冷冻,待取样全部结束后将其转至-80℃冰箱保存备用。


第三章 皮肤损伤动物模型及鹿茸尖端提取物的治疗


3.1 材料与方法

3.1.1 材料

1  实验药物及制剂见表 3-1

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3.2 结果

3.2.1 外观形态学结果

图中分别为大鼠 0d、5d、10d、15d、20d、25d、30d 的大鼠皮肤恢复境况,从图中可见治疗组的伤口恢复速度明显快于模型组大鼠,通过用 PS 像素的方法计算大鼠伤口愈合的相对面积,统计分析可见,在鹿茸作用后 5d 大鼠伤口面积显著减少,治疗的 5-15d 治愈的速度最快,在治疗 20d 时,伤口几乎愈合完毕。而应用 PBS 的对照组,伤口在 25d时才完全愈合。可见鹿茸在皮肤愈合方面具有一定的促进作用,见图 3.1。

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结论

本实验建立肝纤维化动物模型采用了 CC14 诱导的方法,建模成功后使用鹿茸干细胞治疗,观看其治疗效果。结果显示大鼠肝纤维化动物模型建立成功,鹿茸干细胞在其治疗方面有很好的疗效。

本实验选用苯甲酸雌二醇联合黄体酮,通过肌肉注射的方法建立动物模型。在建模成功后使用鹿角盘治疗。结果显示大鼠乳腺增生动物模型建立成功,鹿角盘在其治疗方面疗效显著。

本实验用打孔器在大鼠背部打孔的方法建立皮肤损伤动物模型,在建模成功后使用鹿茸尖部 RM 层提取物治疗。结果显示大鼠皮肤损伤动物模型建立成功,鹿茸尖部提取物具有促进伤口愈合及皮肤再生的效果。

参考文献(略)

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