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梅花鹿5种不同药用部位抗氧化与抗肝癌作用的药学比较研究

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  • 论文编号:el201805102223118689
  • 日期:2018-05-10
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本文是一篇药学论文,药学专业培养具备药学学科基本理论、基本知识和实验技能,能在药品生产、检验、流通、使用和研究与开发领域从事鉴定、药物设计、一般药物制剂及临床合理用药等方面工作的高级科学技术人才。 药学专业学生主要学习药学各主要分支学科的基本理论和基本知识,受到药学实验方法和技能的基本训练,具有药物制备、质量控制评价及指导合理用药的基本能力。(以上内容来自百度百科)今天为大家推荐一篇药学论文,供大家参考。
 
第一篇 文献综述
 
第一章 梅花鹿5种不同药用部位化学成分的比较研究
梅花鹿是我国珍贵的传统药用性动物之一,特产于我国的东北部地区[1]。梅花鹿产品作为常用的中药材被应用于临床中,具有悠久的历史。鹿茸,鹿角脱盘,鹿血,鹿肉,鹿骨等传统的梅花鹿药用部位均被记载于各朝代与各版本的医学专著中。根据古籍记载,梅花鹿鹿茸,鹿角脱盘,鹿血,鹿肉,鹿骨这 5 种入药部位使用广泛,但在临床应用上差异较大。现代中药学研究发现,这 5 种药用部位均具有丰富的营养成分,是滋补强壮身体的佳品。
 
1.1 鹿茸的化学成分
雄性梅花鹿的幼角,遍生茸毛未经骨化,称为梅花鹿鹿茸[3-4]。梅花鹿鹿茸是珍贵的动物性药材,应用广泛,从《神农本草经》开始收录于各版本专著中[5]。鹿茸含有多种营养物质,例如蛋白质、氨基酸、矿物质和脂质等[6]。
 
1.1.1 矿物质元素
梅花鹿鹿茸中目前发现含有 26 种矿物质。其中 Na、Ca、P、Mg 和 K 是人体必需的常量元素,Cu、Fe、Cr、Zn、Ni、Mo、Sr、Co、Mn、Sn 和 V11 种是人体必需的微量元素[7-8],此中 Mg 和 Fe 的含量较高[9]。矿物元素在鹿茸中的质量分数接近 20%,人体内许多重要生理作用与其息息相关,也是鹿茸发挥药理活性的重要成分[11]。其中一些矿物质元素是某些酶、维生素等的重要组成部分[12]。
 
1.1.2 蛋白质和多肽
鹿茸的蛋白含量为 49.54%~54.68%,其增强免疫、促进生长发育及强身健体等药理活性可能与鹿茸蛋白相关[13]。鹿茸的采收、加工以及贮藏方式都对鹿茸的蛋白含量有直接的影响[14]。近些年来,研究者通过多种技术手段将提取的混合多肽进一步分离纯化,而鹿茸多肽则被认为是其主要的活性成分,药理活性显著[15-17]。张郑瑶等[18]从梅花鹿鹿茸中分离出纯度达 99%,分子量为 3263.4u 的多肽,并对表皮细胞核软骨细胞具有促进增 值 作 用 。 Yan 等[19]在 鹿 茸 中 提 取 分 离 得 到 多 肽 CNT14 , 氨 基 酸 序 列 是E-P-T-V-L-D-E-V-C-L-A-H-G-P。Guan 等[20]从鹿茸中分离出一个含有32种氨基酸的多肽。严铭铭[21]从梅花鹿鹿茸中提取纯化出一多肽,能够促使小鼠海马神经元细胞生长。王丰等[22]通过一系列分离纯化手段等到一个多肽,其分子量为 3095.1u,由缬氨酸、赖氨酸、甘氨酸及丙氨酸构成。鹿茸中含有丰富的胶原蛋白。赵玉红等[23]从梅花鹿鹿茸中提取出了具有完整三螺旋结构的Ⅰ型胶原。
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1.2 鹿角脱盘的化学成分
梅花鹿或马鹿等鹿科动物采茸之后,角柄上残留的鹿茸部分骨化,翌年脱落,这部分角基就称为鹿角脱盘。其中有效成分主要包括:矿物元素、氨基酸、多肽、蛋白质、脂类和胆固醇等。
 
1.2.1 蛋白质及多肽
邱芳萍等[45]测得两种鹿角脱盘蛋白 APPA 和 APPB,其中 APPA 主要成分为大分子蛋白混合物,APPB 的分子量范围为 20.1~30.1KD。较梅花鹿鹿茸、鹿角脱盘及鹿骨中水溶性蛋白的含量,依次为 93%、88%、73%,SDS-PAGE 电泳后鹿茸可见 8 条带,66KD的蛋白含量最多,其次是 14KD 的蛋白,鹿角脱盘可见 11 条带,其中 66KD 的蛋白含量最多, 51KD 蛋白次之,而鹿骨中几乎无明显蛋白带[46]。王志兵等[47]提取鹿角脱盘中的胶原蛋白后,酶解制得蛋白多肽,经 Folin 酚法和水合茚三酮法鉴定后,电泳后测定出其分子量为 8~15KD。卫庆功等[48]从马鹿鹿角脱盘中提取出的胶原蛋白确定为Ⅰ型胶原蛋白,分子量大小为 105~220KD。幺宝金等[49]应用 pH 为碱性的浸提缓冲液时,从鹿角脱盘中提取出的蛋白含量最高,表明鹿角脱盘中存在较多的酸性蛋白。徐云凤等[50]应用酶解法得到了胶原蛋白分子,水溶性较好,有助于对其进行消化促进机体吸收。胡薇等[51]从鹿角脱盘中提取得到蛋白质含量为 91.80%的总肽,总肽主要含 5 种多肽,分子量为11kDa、18kDa、40kDa、64kDa、80kDa。
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第二章 梅花鹿5种不同药用部位药理活性的比较研究
 
梅花鹿的不同药用部位皆具有多种营养物质与药理活性且效果显著,目前研究针对鹿茸与鹿角脱盘的药理活性研究较多,二者均有显著的抗氧化作用并能抑制肿瘤生长。
 
2.1 鹿茸的药理活性
2.1.1 抗肿瘤作用
范玉林等[13]将分离纯化后的鹿茸蛋白对接种 S180 的小鼠进行腹腔注射和灌胃给药,小鼠用药后存活时间明显长于其他组,这说明提取的鹿茸蛋白对患有肿瘤的小鼠有良好的疗效。唐巍然等[76]发现鹿茸多糖可增强机体的免疫力,使免疫活性细胞识别肿瘤细胞产生免疫反应,从而达到抑制或破坏其生长。鹿茸精可以使白血病细胞的基因表达大幅下降,使其向重新向正常细胞进行分化[77]。霍玉书等[78]在 PC-12 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤株中加入鹿茸提取物,发现细胞增殖速度降低,有显著的促进细胞分化作用。杨吉利等[79]发现鹿茸多肽能够抑制破骨细胞激活过度,维持成骨和破骨作用,从而抑制骨转移肿瘤的生长。齐艳萍等[80]发现鹿茸可以提升肿瘤小鼠免疫器官指数,保护脾的正常状态和功能,具有免疫增强作用,提高患病小鼠的免疫力从而起到抑制肿瘤的作用。
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2.1.2 免疫增强作用
鹿茸能够刺激体液与细胞的免疫反应,对提高免疫力与抵抗力有显著作用[81]。鹿茸醇提物能够抵抗环磷酰胺对 C3b 的影响,显著改善环磷酰胺对机体的免疫抑制[82]。鹿茸醇提物还可以使因环磷酰胺副作用致使体重下降的小鼠的体重显著升高,使小鼠体内球蛋白浓度升高[83]。研究发现鹿茸的提取物明显提高免疫能力,增加脾细胞的玫瑰花结细胞数,对红细胞凝集素与红细胞溶血素的影响也明显高于对照组,说明鹿茸能使免疫能力显著增强[84]。Zha 等[85]使用 3.2ku 的梅花鹿鹿茸多肽刺激小鼠,结果表明小鼠淋巴细胞数量增多,同时 CD4 与 CD8 的数量也明显增多。周秋丽等[86]研究发现鹿茸多肽可增强巨噬细胞的吞噬能力,对其有促进作用。罗翔丹等[87]发现鹿茸多肽可以缓解由白洁引起的大鼠胸腺与脾脏萎缩,提高淋巴细胞和淋巴细胞脱氢酶的活性,提高肺泡巨噬细胞的吞噬功能。王岩等[88]研究证明鹿茸胶囊可显著抑制由二甲苯引起的鼠耳肿胀,提高机体的免疫能力,有一定的抗炎作用。孙晓波等[89]研究发现,鹿茸精可以增强小鼠 RES的吞噬功能,使小鼠血清凝集素抗体的效价提高,表明其具有增强机体免疫的作用。杨阳等[90]提纯的梅花鹿鹿茸多肽具有免疫增强作用,从而减少被外界病毒感染的几率,缓解疲劳。
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2.2 鹿角脱盘的药理活性
 
2.2.1 抗肿瘤作用
陈玉山等[119]对鹿角脱盘注射液研究发现,鹿角脱盘可使小鼠的巨噬细胞的吞噬能力增强,使小鼠的 T 淋巴细胞增殖并且促进 MA-737 小鼠的肿瘤坏死。胡薇等[51]发现从鹿角脱盘中分离出的总肽能显著抑制小鼠乳腺癌细胞 MA782 的增殖,阻止细胞的正常分裂,使细胞增殖速度减慢。鹿角脱盘多肽能够抑制 MA782 细胞端粒酶活性,使基因不能正常表达,且随着浓度的升高和时间的延长,抑制的程度更显著。所以鹿角脱盘具有一定的抗肿瘤活性[120]。史小青等[129]通过对小鼠游泳实验发现鹿角脱盘胶组、鹿角脱盘霜组、鹿角脱盘蛋白组均有显著的抗疲劳功效,都能使糖原在机体内的储备显著地增加,可以提高耐力并延长活动时间,增强小鼠对疲劳的抵抗作用。牛放等[121]发现梅花鹿鹿角脱盘提取物有较强的延缓疲劳作用,提高运动耐力,可减少小鼠运动前后乳酸的积累,加速乳酸及代谢物的清除,快速补充体力,增强运动力。
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第三章 梅花鹿 5 种不同药用部位抗氧化作用的比较研究........20
3.1 材料与方法 ........ 20
3.2 结果 .... 20
3.3 讨论 .... 22
3.4 小结 .... 22
第四章 梅花鹿 5 种不同药用部位抗肿瘤作用的比较研究........23
4.1 材料与方法 ........ 23
4.2 结果 .... 26
4.3 讨论 .... 61
4.4 小结 .... 62
 
第四章 梅花鹿5种不同药用部位抗肿瘤作用的比较研究#p#分页标题#e#
 
癌症是破坏人类身体健康的最大威胁之一,目前梅花鹿鹿茸与鹿角脱盘已被证明确有一定的抗肿瘤作用,但对其他梅花鹿其他药用部位抗肿瘤作用未见报道。因此本章实验的主要内容旨在将鹿血,鹿肉,鹿骨的抗肿瘤作用与鹿茸和鹿角脱盘进行对比研究,为梅花鹿类药材药理作用的开发利用提供理论依据。准确称量鹿茸,鹿角脱盘,鹿血,鹿肉,鹿骨高压水提处理全粉和相应水提物及鹿茸与鹿角脱盘原粉,用羟甲基纤维素钠溶液稀释至给药浓度,5-氟尿嘧啶(5- FU)用生理盐水配成所需浓度,分别采用灌胃和腹腔注射给药。将小鼠分成 25 组,每组 16 只。分别为正常组(NC),模型组(MC),阳性药组(5-FU),鹿茸高压水提物低、中、高组(A、B、C),鹿角盘高压水提物低、中、高组(D、E、F),鹿血高压水提物低、中、高组(G、H、I),鹿肉高压水提物低、中、高组(J、K、L),鹿骨高压水提物低、中、高组(M、N、O),鹿茸高压水提处理全粉组(P),鹿角脱盘水提高压处理全粉组(Q),鹿血高压水提处理全粉组(R),鹿肉高压水提处理全粉组(S),鹿骨高压水提处理全粉组(T),鹿茸原粉组(U),鹿角脱盘原粉组(V)。
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结 论
 
1、梅花鹿 5 种不同药用部位水溶性粗蛋白质含量存在显著差异(P<0.05),5 种不同药用部位其水溶性粗蛋白质含量从大到小为:鹿茸>鹿角脱盘>鹿血>鹿肉>鹿骨。
2、梅花鹿 5 种不同药用部位所含氨基酸的量和种类不同(P<0.05)。鹿茸、鹿角脱盘与鹿骨中各氨基酸含量以甘氨酸最高,鹿血中各氨基酸含量以苯丙氨酸最高,鹿肉中各氨基酸含量以谷氨酸最高。5 种药用部位间鹿茸的甘氨酸含量最高,鹿血的苯丙氨酸含量最高,鹿肉的谷氨酸含量最高。
3、梅花鹿 5 种不同药用部位间的 DPPH·自由基清除率和总抗氧化能力均存在显著性差异(P<0.05)。DPPH·自由基清除率由高到低的顺序为:为鹿角脱盘>鹿茸>鹿血>鹿骨>鹿肉,总抗氧化能力由高到低的顺序为:鹿茸>鹿角脱盘>鹿血>鹿骨>鹿肉。
4、鹿茸、鹿角脱盘、鹿血、鹿肉和鹿骨高压水提物组、高压水提全粉组和鹿茸、鹿角脱盘原粉组均能显著提高小鼠的胸腺与脾脏指数(P<0.05)。其中鹿茸和鹿角脱盘高压水提物高剂量组的效果最佳。
5、鹿茸、鹿角脱盘、鹿血、鹿肉和鹿骨高压水提物、高压水提处理全粉组和鹿茸、鹿角脱盘原粉组均能抑制肿瘤生长(P<0.05)。保护脾脏组织和维护脾脏功能,使肿瘤细胞凋亡促使恶性瘤组织坏死。鹿茸与鹿角脱盘高压水提物高剂量组能够明显提高 H22小鼠脾 T 淋巴细胞的活性(P<0.05)。
6、鹿茸、鹿角脱盘、鹿血、鹿肉和鹿骨高压水提物组、高压水提处理全粉组和鹿茸、鹿角脱盘原粉组能够提高 IgE、IgM 和 IgG 的含量,提高血清中 TNF-α,IFN-γ,IL-2,IL-6,IL-12 的含量,减少 TGF-β的分泌,提高外周血与脾细胞中 CD4+/CD8+的值,对改善免疫能力具有显著效果。其中鹿茸与鹿角脱盘高压水提物高剂量组效果显著。
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参考文献(略)
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