药学论文哪里有？本实验制备的脂质体载药量较低，由于载药量与包封率、粒径等指标密切相关，只能在保证包封率高，粒径小的前提下提高载药量，载药量可能与制备方法、药脂比、冻干保护剂种类和用量有关，因此后续可通过调整药脂比和冻干保护剂的用量等方法来提高其载药量；
第一部分 综述
1 茯苓皮总三萜的研究进展
1.1 茯苓皮总三萜的化学成分
茯苓皮中主要有多糖和三萜两类化学成分，而茯苓皮总三萜（TTP）作为三萜类中的主要化学成分，目前报道的有 84 种[20]，主要包含羊毛甾-8-烯型、羊毛甾-7，9(11)-二烯型、3，4-开环-羊毛甾-8-烯型、3，4-开环-羊毛甾-7,9(11)-二烯型等[20]。
1.2 茯苓皮总三萜的药理作用
1.2.1 对泌尿系统作用
相关研究表明三萜类成分通过调控肾素-血管紧张素系统（RAS），防止细胞死亡，调节水和钠路径，平衡水分等途径调控泌尿系统[20]。
田婷等[21]报道在 150 至 600 mg·kg−1·d−1给药剂量范围内，茯苓皮乙醇提取物使大鼠尿量增加 21%到 42%，且增加保钾排钠作用，茯苓皮醇提取物的利尿作用可能是[21]由于茯苓皮中主含有四环三萜类化合物，它与醛固酮及其拮抗剂(如螺内酯等)结构相似，所以抑制了肾小管对电解质和水的重吸收。
三萜类成分具有良好的肾保护作用，可在一定程度防治肾病综合征等肾脏疾病。王明课题组[22]发现茯苓三萜酸，可通过调节 RAS 和减轻管间质纤维化（TIF）来治疗慢性肾病(CKD)。而 TIF 是 CKD 的共同病理特征，陈丹倩课题组[23]通过分离出茯苓酸 A，证明茯苓酸 A 通过选择性阻断 AMPK 下游的 Smad3 与 TGFβRI 和 SARA 的结合而抑制 Smad3 磷酸化，从而上调 AMPK 活性减轻肾间质纤维化。
肾病综合征与肾脏对水和钠的处理方式改变以及水通道蛋白（AQPs）和上皮钠通道（ENaCs）的水平变化有关。Lee 等[24]发现茯苓菌核水提物（200 mg/kg-1/天-1）通过抑制蛋白尿和腹水来改善肾病综合征 AQP2 和 ENaC 的表达，通过抑制水和钠通道影响体液调节，改善肾脏失调如水肿或肾病。
第三部分 茯苓皮总三萜脂质体的制备工艺研究
2 脂质体制备工艺的研究
2.1 脂质体制备方法的筛选
脂质体的制备方法众多，本实验选择以下 3 种常见的方法制备脂质体，以包封率和粒径为指标，综合评价选择出一种制备方法。
2.1.1 薄膜分散法
按照处方配比称取大豆卵磷脂（以下简称卵磷脂）、胆固醇、茯苓皮总三萜提取物（以下简称为药物，均出自同一批次 20200714），加入适量的无水乙醇超声溶解，旋蒸（45℃）挥去乙醇，向脂膜中加入 30ml （pH=7.0）的 PBS 水合，探头超声2 min（功率 10%），即得茯苓皮总三萜脂质体混悬液。
2.1.2 乙醇注入法
按照上述处方比例称取卵磷脂、胆固醇、药物，加入适量的无水乙醇超声溶解，吸取上述溶液，并注入到不断搅拌的 30mL PBS 中（pH=7.0），磁力搅拌，旋蒸（45℃）挥去乙醇，探头超声 2 min（功率 10%），即得茯苓皮总三萜脂质体混悬液。
2.1.3 逆向蒸发法
按照上述处方配比称取卵磷脂、胆固醇、药物，加入适量的无水乙醇超声溶解，将有机相缓慢滴入到不断搅拌的 30mL PBS 中（pH=7.0），磁力搅拌，旋蒸挥去乙醇（45℃），再加入适量的 PBS 旋转水合，探头超声 2 min（功率 10%），即得茯苓皮总三萜脂质体混悬液。
第五部分 脂质体的质量评价及体外释放度研究
1 仪器与试药
1.1 仪器
1.2 试药与试剂
2 冻干脂质体的质量评价
2.1 外观
本实验制备的 HA 修饰的茯苓皮总三萜冻干粉末洁白松软，无塌陷，饱满规整，且复溶后外观澄清透明。
2.2 形态观察
采用磷钨酸负染法[110]取适量的冻干脂质体复溶后溶液，经 0.45µm 滤膜过滤[111]。将其滴入铜网上晾干，待滤纸吸去多余的液体后[112]，滴入浓度为 2%的磷钨酸溶液中，染色，晾干[113]，用透射电镜观察脂质体的形态，发现照片中粒子形态多圆整呈球状。
2.3 粒径、PDI、Zeta 电位测定
取冻干粉各 3 份，加适量蒸馏水稀释复溶，通过纳米粒径仪测定粒径、PDI 及其Zeta 电位，平行测定 3 次。
2.4 包封率的测定
取 2.3 下冻干粉各 3 份，冻干粉加原体积的 PBS 溶液复溶，各取 1mL 脂质体溶液置于离心管中，于低温高速（14000r/min ，4℃）条件下离心 30 min[115]，弃去上清液后用甲醇溶解底部沉淀物，超声，转移至 2 mL 容量瓶中[116]，在 2.1 色谱条件下进样测定药物质量，记为 W包｡另取冻干脂质体复溶液各 1mL 加入 2mL 容量瓶中，甲醇溶解定容，超声破乳，在上述色谱条件下进样测定脂质体中的总药量，记为 W总｡计算冻干脂质体复溶后的包封率。
结语
脂质体作为一种新剂型，近年来被广泛应用于制剂领域，本实验基于提高茯苓皮总三萜的生物利用度，通过对茯苓皮总三萜脂质体的研究，主要完成了以下工作：
1.成功建立了茯苓皮总三萜脂质体含量的测定方法，并进行了方法学考察。通过对包封率测定方法的前期筛选，最终确定采用高速低温离心法。
2.脂质体的制备方法较多，本实验以包封率和粒径大小作为评价指标，最后选择了乙醇注入法。在单因素考察实验中，选择了几个影响较大的因素进行了考察，并通过正交试验优化，最终确定处方：磷脂-胆固醇质量比为 7:1，药脂比为 1:3，PBS 的 pH 值为 7.0，并进行了工艺验证。
3.在制备 HA 修饰的茯苓皮总三萜脂质体时，通过对 HA 的用量、搅拌转速、探头超声时间进行了单因素考察，最终确定处方为：采用电荷吸附法取 0.5mg/mL 的 HA水溶液并超声，将此 HA 水溶液缓慢滴入到不断搅拌的茯苓皮总三萜脂质体溶液中，磁力搅拌 30min（650 r/min，60℃），探头超声 2 min（10% 功率）使粒径均匀，即得 HA 修饰的茯苓皮总三萜脂质体溶液。
4.为了进一步提高脂质体溶液的稳定性，本实验采用了冷冻干燥法对 HA 修饰的茯苓皮总三萜脂质体进行了冻干工艺研究，通过对冻干保护剂的种类和用量进行筛选，最终确定脂质体冻干工艺为：称取卵磷脂、胆固醇、药物（磷脂-胆固醇质量比为 7:1，药脂比为 1:3），加入适量的无水乙醇超声溶解，吸取上述溶液，并注入到不断搅拌的 30mL PBS 中（pH=7.0），磁力搅拌 30 min，旋蒸除去乙醇（45℃），即得茯苓皮总三萜脂质体溶液。取 0.5mg/mL 的 HA 水溶液并超声，将此 HA 水溶液缓慢滴入到不断搅拌的已制备的茯苓皮总三萜脂质体溶液中，磁力搅拌30min（650 r/min，60℃），此时向脂体溶液中继续加入甘露醇（甘露醇-脂质体质量比 1.5:1），继续磁力搅拌 30 min，探头超声 2 min（10%功率）使粒径均匀，即得冻干脂质体溶液。按照 3.3 下冻干条件进行冷冻干燥，即得 HA 修饰的茯苓皮总三萜冻干脂质体。
参考文献（略）
