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辐状肋柱花石油醚提取物化学成分及其对肿瘤细胞抑制活性评价

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  • 用途: 硕士毕业论文 Master Thesis
  • 作者:上海论文网
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  • 论文字数:43622
  • 论文编号:el202203141227210
  • 日期:2022-04-10
  • 来源:上海论文网

药学论文哪里有?本实验对辐状肋柱花进行了化学成分分析及其对肿瘤细胞的抑制活性评价,这一系列实验在一定程度上为今后开发利用蒙药辐状肋柱花奠定了基础数据。本课题只对辐状肋柱花石油醚提取部分进行了研究,对于化学成分的分析还不够全面,因此,对辐状肋柱花的化学成分还需要继续对乙酸乙酯和正丁醇提取部分进行分析工作。


第一章 绪论


1.3  辐状肋柱花的主要化学成分

目前对辐状肋柱花的研究报道较少,通过检索文献,从辐状肋柱花中主要分离鉴定了𠮿酮类和黄酮及其苷类化合物,此外还有三萜类、环烯醚萜类以及其他类化合物。

1.3.1  𠮿酮类

𠮿酮类(xanthones),又称苯骈色原酮,也称呫吨酮类,呈黄色或淡黄色,与黄酮类化合物有相似的颜色反应和结构特征。通常存在于龙胆科、桑科、远志科和豆科植物,具有保肝利胆、抗肿瘤、抗抑郁等生物活性。辐状肋柱花属于龙胆科植物,根据相关研究报道,该植物里分离得到 12 个𠮿酮类化合物,分别为 1-hydroxy-3, 7,8-trimethoxyxanthone[8,9,10,11,14]、 1-hydroxy-3,5,8-trimethoxyxanthone[8,9,10] 、8-hydroxy-1,3,5-trimethoxyxanthone[8,9]、 1,8-dihydroxy-3,5-dimethoxyxanthone[8,11] 、 1,8-dihydroxy-3,4,5-trimethoxyxanthone[9]、 1,7-dihydroxy-3,8-dimethoxyxanthone[10] 、1,8-dihydroxy-4,5-dimethoxy-6,7-methylenedioxyxanthone[12]、1,2,6-trihydroxyxanthone-8-O-β-D-glucoside[12] 、1,4,8-trihydroxyxanthone-6-O-β-D-glucoside-(1 → 6)O-β-D-glucoside[12] 、 芒 果 苷 [13] 、 swertipunicoside [13]、  bellidifollin [14]。

1.3.2 黄酮类

黄酮类化合物广泛存在于天然产物中,并且结构多样,化学性质稳定,有良好的活性。目前,从辐状肋柱花中共分离鉴定得到 11 个黄酮类化合物,分别为木犀草素[9,11]、木犀草素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷[11]、木犀草素-7-O-葡萄糖苷[15]、木犀草素-4'-O-葡萄糖苷[10]、芹菜素[9]、芹菜素-7-O-葡萄糖苷[15]、山萘酚[15]、槲皮素[9]、异荭草苷[13]、异牡荆素[13]、当药黄素[10,14]。


第二章 实验材料与方法


2.1  实验材料

2.1.1  实验药材

实验用辐状肋柱花全草采集于内蒙古地区,鉴定为龙胆科肋柱花属植物辐状肋柱花  [Lomatogonium rotatum (L.) Fries ex Nym.],凭证标本  (编号:YB-LR20181120)存放于实验室标本库。

2.1.2  实验仪器

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取干燥的辐状肋柱花全草(9 kg),用 75%乙醇在室温下浸泡提取 3 次,合并 3次的提取液后减压浓缩滤液得到乙醇提取浸膏(2 kg)。将浓缩后的乙醇提取物用适量的水溶解,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇三种有机溶剂萃取三次,最终得到石油醚萃取物(209 g),乙酸乙酯萃取物(239 g)和正丁醇萃取物(502 g)。辐状肋柱花的提取与萃取流程图详见图 1。


第三章 结果与讨论


3.1  化合物 1-18 的结构鉴定

3.1.1  化合物 1 的结构鉴定

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化合物 1:黄色针状晶体,分子式为 C15H12O6,分子量为 288.06。

H-NMR(300 MHz, chloroform-d)谱显示:2 个羟基氢质子信号 δH (ppm) 11.95 (1H, s, 1-OH)、11.36 (1H, s, 8-OH),  苯环上 4 个氢质子信号 δH (ppm) 7.21 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-6)、6.69 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-7)、6.51 (1H, d, J = 2.3 Hz, H-4)、6.33 (1H, d, J = 2.3 Hz, H-2), 2 个甲氧基氢质子信号 δH (ppm) 3.94 (3H, s, 3-OCH3)、3.88 (3H, s, 5-OCH3)。 

C-NMR(75 MHz, chloroform-d)谱共显示 15 个碳信号,包括 1 个羰基碳信号δC (ppm)  184.7  (C-9),  苯环上 12 个碳信号 δC (ppm)  167.6  (C-3)、162.9  (C-1)、157.8 (C-4a)、154.2 (C-8)、145.5 (C-4b)、140.0 (C-5)、120.4 (C-6)、109.4 (C-7)、108.2 (C-8a)、102.9 (C-8b)、98.0 (C-2)、93.2 (C-4), 2 个甲氧基碳信号 δC (ppm) 57.5 (3-OCH3)、56.1 (5-OCH3)。

综合以上解析过程,该化合物 NMR 数据和相关参考文献基本一致,故确定化合物 1 为 1,8-dihydroxy-3,5-dimethoxyxanthone[22],化合物的核磁共振氢谱和碳谱数据见表 3。


3.2  化合物 1-18 的抗肿瘤活性实验结果

3.2.1  化合物 1-18 对宫颈癌 HeLa 细胞的增殖抑制作用

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如图 4 所示,结果表明,在给药浓度 30 μM 时,化合物 10、12、16-17 对宫颈癌Hela 细胞具有一定的抑制作用,抑制率分别为 91.67%、93.00%、84.33%、65.33%,其中化合物 10、12 和 16 的抑制率达到 80%以上,对宫颈癌 Hela 细胞有很好的抑制活性。


第五章 结论

本文以辐状肋柱花为药材,首先对辐状肋柱花进行提取与萃取,选取石油醚提取部分进行分离纯化,采用核磁共振波谱法结构鉴定,最后对分离得到的化合物进行抗肿瘤生物活性研究,得出了如下结论:

1. 对辐状肋柱花石油醚提取部分进行分离纯化,共分离得到 18 个化合物。其中,包括 9 个𠮿酮类化合物(1−9),5 个三萜类化合物(10−14),3 个木脂素类化合物(15、16、17)以及 1 个黄酮类化合物(18)。其中,𠮿酮类化合物分离得到较多,说明是辐状肋柱花的主要化学成分。

2.化合物 2、3 是首次从辐状肋柱花中分离得到,化合物 12、14、17 是首次从龙胆科中分离得到,化合物 5、11、13、15、16 是首次从肋柱花属分离得到。提供了本植物分类标记物的依据

3.采用 MTT 法对化合物 1−18 进行宫颈癌细胞(HeL a)、肺癌细胞(A-549)、肝癌细胞(SK-Hep1)的抑制肿瘤细胞活性实验结果表明,化合物 10 和 12 同时对三种肿瘤细胞有明显的效果,其中化合物 10 对三种肿瘤细胞的 IC50值为 14.82 ± 1.53、25.80 ± 3.91 和 8.11 ± 0.78 μM,化合物 11 对三种肿瘤细胞的 IC50值为 21.34 ± 1.62、29.26 ± 2.35 和 16.24 ± 2.09 μM。

4.本实验对辐状肋柱花进行了化学成分分析及其对肿瘤细胞的抑制活性评价,这一系列实验在一定程度上为今后开发利用蒙药辐状肋柱花奠定了基础数据。本课题只对辐状肋柱花石油醚提取部分进行了研究,对于化学成分的分析还不够全面,因此,对辐状肋柱花的化学成分还需要继续对乙酸乙酯和正丁醇提取部分进行分析工作。

参考文献(略)

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