药学论文哪里有？本文的创新性体现在以下两个方面：（1）通过建立非酒精性脂肪肝体内外模型，首次证明了丹叶大黄素对非酒精性脂肪肝具有治疗作用。（2）从细胞分子机制层面阐释丹叶大黄素是过降低细胞内 ACOX1的表达，进而抑制细胞内乙酰辅酶 A 的产生，来激活脂噬发挥对非酒精性脂肪肝的治疗作用。
1 文献综述
1.2 非酒精性脂肪肝的流行病学研究
NAFLD 的负担在全世界都在增加，通常与肥胖有关。在 65％-85％的肥胖患者中观察到 NAFLD，其全球患病率约为 25％，且男性患病率高于女性[8]。NAFLD 在全球范围内有很大的地理差异，这可能是由于人群的遗传组成、饮食习惯和环境方面的差异所致。据报道，中东和南美国家的患病率最高（约 30%），而来自非洲的研究数据有限，报告的患病率低得多（约 13%）[9-11]。NAFLD 流行病学的研究多来自于北美，该地区的患病率为 21-24.7%。与基于影像学的研究相比，使用血清标志物研究记录的患病率相对较少。在一项对 2015 年之前发表的研究分析中，欧洲也报告了类似的非酒精性脂肪肝患病率（约 24%）。就需要临床治疗的人数而言，非酒精性脂肪肝在美国和欧洲造成了巨大的公共卫生负担（分别为6400 万和 5200 万）。而亚洲，由于其更庞大的人口、快速城市化以及不断上升的经济趋势，将在未来几年承担全球非酒精性脂肪肝负担的主要部分[12]。亚洲广阔的地理分布、不同国家之间以及国家内部在经济发展、饮食和生活方式方面的区域差异以及可能的遗传影响导致亚洲地区 NAFLD患病率差异很大。流行病学调查资料表明，日本 NAFLD 患病率为 23-26%，韩国为 27%，印度为 9-32%，南亚和远东其他地区（斯里兰卡、马来亚、斯里兰卡和印度尼西亚）为 5-30%。而中国大陆 NAFLD 患病率为12.5-38%，台湾为 12-51%，香港为 28%。目前，NAFLD 已成为我国引起肝功能异常及慢性肝病的第二大病因。
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3 实验结果
3.1 3-MA 对丹叶大黄素药效的影响
TC 和 TG 测定结果如图 5.1 所示，相比于 control 组，Model 组细胞中 TC 和 TG 的水平显著升高（P<0.05 或 P<0.01）；相比于 Model 组，丹叶大黄素给药组降低了细胞中 TC 和 TG 的水平（P<0.05 或 P<0.01），而3-MA 的加入逆转了丹叶大黄素的治疗效果；与丹叶大黄素给药组相比，3-MA 组的 TG 水平升高（P<0.05）。
图 5.1 3-MA 对丹叶大黄素药效的影响
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4 讨论
4.1丹叶大黄素对细胞中乙酰辅酶 A 的影响
ELISA 试剂盒检测细胞中的乙酰辅酶 A 水平，结果如图 5.2 所示.相比于 control 组，Model 组细胞中的乙酰辅酶 A 水平显著升高（P<0.001）;相比于 Model 组，丹叶大黄素中和高给药组显著降低了细胞中乙酰辅酶 A的水平（P<0.05 或 P<0.001），而 3-MA 的加入逆转了丹叶大黄素的治疗效果；与丹叶大黄素给药组相比，3-MA 组的乙酰辅酶 A 水平升高（P<0.01）。
图 5.2 细胞中乙酰辅酶 A 的含量
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4.2丹叶大黄素对细胞中自噬调节蛋白的影响
ACOX1 及自噬相关蛋白表达结果如图 5.3 所示。与 Control 组相比，Model 组 L-02 细胞内 ACOX1、p-MTOR 和 p-ULK1 蛋白表达显著升高（P<0.01），Model 组 L-02 细胞内 Atg5 蛋白表达下降（P<0.05）；丹叶大黄素处理后，中、高剂量组显著降低了细胞中 ACOX1、p-MTOR 和p-ULK1 蛋白的表达（P<0.01），同时丹叶大黄素各剂量组细胞中 Atg5蛋白的表达升高（P<0.05）；与丹叶大黄素高剂量组相比，3-MA 组的ACOX1 和 Atg5 蛋白的表达有差异性（P <0.05 或 P<0.01）。
图 5.3 丹叶大黄素对细胞中相关蛋白表达的影响
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结语与创新
丹叶大黄素是一种从中药华北大黄中提取的天然二苯乙烯类活性成分，在华北大黄中含量较高。在体外实验中，以 L-02 细胞为受试对象，采用 FFA 诱导 L-02 细胞脂肪变性模型检测丹叶大黄素对 NAFLD 的治疗作用。在体内实验中，建立了 HFD 诱导的 NAFLD 模型，以临床常用降脂药物阿伐他汀钙片和脂必泰胶囊为阳性对照药，研究丹叶大黄素体内药效。最后结合生化试剂盒、DCFH-DA 冰冻切片染色、油红 O 染色、WesternBlot 等技术揭示了丹叶大黄素在体内外治疗 NAFLD 的活性及其作用机制。研究表明，丹叶大黄素在体内外模型中能够减轻细胞中脂质沉积、抑制细胞内脂质变性引发的氧化应激和炎症反应、改善肝功能，并且通过降低细胞内 ACOX1 的表达，进而抑制细胞内乙酰辅酶 A 的产生，来促进脂质的自噬降解，对非酒精性脂肪肝起到治疗作用。
本文的创新性体现在以下两个方面：
（1）通过建立非酒精性脂肪肝体内外模型，首次证明了丹叶大黄素对非酒精性脂肪肝具有治疗作用。
（2）从细胞分子机制层面阐释丹叶大黄素是过降低细胞内 ACOX1的表达，进而抑制细胞内乙酰辅酶 A 的产生，来激活脂噬发挥对非酒精性脂肪肝的治疗作用。
参考文献（略）
