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茜草地上部分的化学成分和药学质量研究

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  • 论文编号:el2018060721262217116
  • 日期:2018-06-03
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本文是一篇药学论文,药学专业(Pharmacy)是培养具备药学学科基本理论、基本知识和实验技能,能在药品生产、检验、流通、使用和研究与开发领域从事鉴定、药物设计、一般药物制剂及临床合理用药等方面工作的高级科学技术人才的学科。(以上内容来自百度百科)今天为大家推荐一篇药学论文,供大家参考。
 
前言
 
茜草味苦、性寒,有痛经化瘀、凉血止血的功效,用于吐血、关节痹痛、瘀阻经闭等,其始载于《神农本草经》,资源利用历史悠久,除了药用,它的另一主要作用即作为染料[1,2]。我国茜草科的茜草族(Trib. Rubieae)包含 5 属:车叶草属、拉拉藤属、泡果茜草属、长柱草属和茜草属。其中茜草属(Rubia Linn.)为合瓣花亚纲多年生草本植物,种类较多。茜草(Rubia cordifolia L.)即为茜草属中的双子叶植物,其利用价值一直以来也是最高,而且也作为主要的原植物和商品药材的主流品种[3],对它进行的研究也为最多。我国茜草资源非常丰富,药用以陕西、山西和河南为主产区[4],加上茜草对生长环境的适应能力强并一直存在着潜在的价值,使这一资源不断被人们所知,并被进一步的开发和利用。近年来,有学者的研究表明了茜草的药用价值:周琼[5]研究茜草叶子的营养成分,发现其中含量较多的有蛋白质、脂肪和氨基酸,这很有开发、应用价值。刘谦光[6]对茜草藤进行了微量元素的研究,这对茜草药效的影响有一定的参考价值。早先年人们就发现茜草藤的提取液可对小儿腹泻产生明显的抑制作用,可同时改善小儿的消化功能,能促进小儿发育。孙孟章[7]水煎茜草藤用来洗足,治疗秋冬季婴幼儿病毒性腹泻,结果显示疗效明显。但从前人的治疗应用方式上来看,当时的茜草藤还没有一个明确的药用剂型,而目前合肥华润神鹿药业有限公司上市销售的中成药“儿泻停”就弥补了这一缺陷。其以茜草藤作为主药,主治湿热内蕴型小儿腹泻,且临床效果良好[8]。侯显玉[9]以 68 例小儿腹泻患者作为研究对象,进一步证实了儿泻停颗粒治疗小儿腹泻病的临床效果。
综上所述,虽然茜草属植物资源丰富,且分离得到的化学成分也很多,但对它们的药理活性的研究还有很大的空间。近年来对其地上部分药用的重视,进一步拓展了茜草属植物的新用途。从一系列的调查研究中我们可以看到该属植物潜在价值高,应用前景广,对其进行更深入的研究和探讨很有必要,可为今后的综合、高效和可持续开发利用提供科学依据。本次实验通过对茜草藤化学成分的初步研究,明确其主要化学成分类型,进行生药学和质量评价研究,为合肥华润神鹿药业有限公司儿泻停产品中茜草藤原料药寻找本地资源并为其质量控制提供依据,也为茜草藤的安徽中药炮制规范作前期准备工作。
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第一章 茜草藤的化成分研究
 
1 药材来源
本章实验所用药材均为茜草的干燥地上部位。于 2015 年 10 月采自安徽省亳州市涡河边,经安徽中医药大学刘守金教授鉴定为茜草科植物茜草 Rubia cordifoliaL.的地上部分——茜草藤,凭证标本。
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2 提取、分离和鉴定
 
2.1 提取
取干燥茜草藤 8.6 kg,粉碎后以 10 倍量 75 %乙醇回流提取 1.5 h,共 3 次。滤去残渣后合并提取液,减压浓缩至几乎无醇味(回收乙醇),得总浸膏约 458 g。用适量的水将浸膏充分混悬,以少量多次原则分别用石油醚和乙酸乙酯依次萃取,减压浓缩后得乙酸乙酯部位浸膏约 205 g。提取流程如图 1 所示。Fr. 8 组份经混合溶剂(氯仿-甲醇)溶解,上 MCI 柱(小孔树脂)经甲醇-水(1:9, 2:8, 3:7, 4:6, 5:5, 6:4, 7:3, 8:2, 9:1, MeOH, v/v)梯度洗脱,每两个柱体积后换洗脱剂比例,合并洗脱液,减压回收试剂,经 TCL 检识,划分为 5 个部分(Fr. 8.1-Fr. 8.5)。Fr. 8.1 经反复硅胶柱色谱分离纯化,得化合物 10(19 mg),12(40 mg),15(13 mg)。Fr. 8.2 经石油醚-乙酸乙酯(7:1→0:1)梯度洗脱得 2 个部分,再经90 %甲醇系统 Sephadex LH-20 凝胶柱色谱、反复硅胶柱色谱以及半制备柱色谱分离纯化,得化合物 8(18 mg),16(25 mg),17(10 mg)。Fr. 8.3 经石油醚-乙酸乙酯(5:1→0:1)梯度洗脱得 3 个部分,再经半制备柱色谱以及反复硅胶柱色谱分离纯化,得化合物 14(20 mg),13(207 mg),9(2 mg),11(30 mg)。Fr. 8.4 经Sephadex LH-20 凝胶柱色谱(90 %甲醇)及反复硅胶柱色谱分离纯化,得化合物18(9 mg),19(21 mg)。Fr. 8.5 先经正相硅胶柱色谱,以氯仿-甲醇(20:1→0:1)梯度洗脱,后经 ODS 中压制备柱色谱以氯仿-甲醇(20:1)系统分离纯化,得到大量的白色难溶固体,再经硅胶柱色谱反复分离纯化,得化合物 20(21 mg),21(1332mg)。Fr. 9 经多系统展开(三氯甲烷-甲醇、石油醚-乙酸乙酯、石油醚-丙酮等)后,经 TLC 检识均无明显化合物的主点,故并未进行分离。如图 2 所示为乙酸乙酯萃取部位分离流程。
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第三章 茜草藤的紫外、高效液相色谱、指纹图谱研究..........36
1 实验仪器与试药......36
1.1 仪器..........36
1.2 试药..........36
2 方法与结果..............36
2.1 总三萜含量的测定.......36
2.2 齐墩果酸的方法学考察......... 35
2.3 茜草 HPLC 指纹图谱的初步研究....39
3 本章小结.......48
第四章 全文小结.........44
1 化学成分研究...........44
2 质量评价........44
 
第四章 全文小结
 
1 化学成分研究
从茜草藤的乙醇提取物中乙酸乙酯萃取部位共分离得到 22 个化合物,包含一个新化合物(14)。从目前分离得到的化合物类型来看,茜草藤的主要化学成分为萜类及木脂素类,这与其地下根部的主要化学成分[36]有些许不同。因首次从其地上部分分离化学成分且作业时间短,实验方法不够成熟,故还有很多的化合物尚未分离得到,还需进一步的实验探究完善。总之,从茜草藤中分离得到的主要化合物情况分析,木脂素类和萜类化合物具有一定的抗菌、抗炎及抗肿瘤活性,这与儿泻停颗粒主治湿热内藴型小儿腹泻的疗效是否有一定的相关性,还有待进一步的研究。
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结论
 
本实验对茜草藤通过加热回流的方法提取成分,并以紫外-可见分光光度法和液相色谱法作为获取数据的检测手段。本实验以三萜成分(齐墩果酸)作为质量标准评价指标,其是共有成分并较易获得,且拥有的抗菌、抗炎药理活性与中成药儿泻停的功效相仿。目前,对茜草藤的质量研究尚未见报道,而实验中分离得到的三萜类成分齐墩果酸量大,应为茜草藤的主成分,故我们以其作为质量控制指标建立的含量测定方法,为茜草藤质量标准的制定奠定基础。也为进一步完善并拟定茜草藤质量标准提供依据。建立了高效液相色谱法测定茜草藤样品中齐墩果酸含量的方法,采用的 HPLC法,操作简便、精密度高、干扰少。方法学考察结果表明,该法简单、准确、灵敏、快速,这为进一步研究茜草藤的质量控制提供了科学依据。初步建立了茜草藤的特征图谱,可更加有效的地控制茜草的质量,这为进一步完善并拟定茜草藤质量标准提供依据。但由于实验所测的样本偏少,故对茜草藤的指纹图谱建立的标准,是否能对该药材的群体一致性特征做出判断,还需要后期大样本的实验研究。
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参考文献(略)
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