农学论文哪里有？笔者认为两株供试菌株对花绒寄甲的侵染都表现出极低的致死率。只有在 1×108 孢子/ml 的孢悬液处理过的花绒寄甲有少量的死亡，供试菌株 Bb3275 和菌株 Bb202对花绒寄甲的侵染率均为 0.00%。由此看来，供试菌株对花绒寄的致病力很弱；采用高浓度菌液进行自然模拟间接侵染花绒寄甲，受到球孢白僵菌侵染的松墨天牛幼虫具有很高的死亡率，但对花绒寄甲的存活力没有影响。由此我们可以初步证明，球孢白僵菌和花绒寄甲具有很好的相容性。
1 文献综述
1.3 利用花绒寄甲防治松墨天牛的研究现状
1.3.1 花绒寄甲的分布
花绒寄甲主要生活范围为东经 105°~135°，北纬 30°~40°。在我国花绒寄甲主要分布在北京、天津、山东、山西、河北、河南、辽宁、上海、江苏、广东、四川、安徽、浙江、湖北、湖南、内蒙古、陕西、宁夏和甘肃东南部等地区。适合花绒寄甲生活条件为：年平均温度在 5.4℃以上，年平均湿度在 47.2%以上，年降水量高于 186.3mm[32-33]。
1.3.2 花绒寄甲的形态特征
成虫：体长 5~11mm，体宽 2~5mm。体扁平，深褐色；触角短小棒状，共 11节；头部、前胸背板和鞘翅上密布刻点[34-35]。卵：长 0.8~1.0mm，宽 0.15~0.2mm，颜色多变，如浅褐色和粉红色。幼虫： 初孵幼虫有明显可见的头部、胸部和腹部；胸足 3 对。蛆型，体长10~14mm。蛹茧：长卵形，丝质。初结茧和最后的颜色不同，由乳白色先变为黑白色，继而会变为深褐色。
1.3.3 花绒寄甲的生活史
关于花绒寄甲，其生活史在我国各地报道都不相同。有研究表明，花绒寄甲成虫有的可存活 6 年之久，但目前对其成虫的寿命还未弄清楚，尚不能较为完整地描绘出花绒寄甲的生活史图[36]。一般情况下，当花绒寄甲成虫期为 3 年时，其个体连同后代可繁殖 54 代，即一对花绒寄甲可繁殖 8000 多头个体[37-39]。
3 材料与方法
3.1 试验材料
3.1.1 供试菌株
试验所用 3 株菌株分离自安徽省九华山风景区及周边地区松林中野外感病死亡的松墨天牛僵虫，用 SDAY 培养基进行分离纯化后获得。球孢白僵菌 Bb202 由安徽农业大学微生物防治省重点实验室提供。以上菌株均保存于安徽省微生物防治重点实验室菌种库。菌株的寄主与来源详见表 1。
实验所需昆虫松墨天牛采自安徽省九华山风景区及周边地区的马尾松纯林中的诱木或死树中，采集来的松墨天牛在温度 25±1℃环境下培养。幼虫放入指形管中，一管一虫，并在管内放置小块松木作为饲料，成虫放入透明保险盒中，一盒一虫，用经过无菌水冲洗的马尾松枝饲喂。
中国林业科学院提供了供试所用的花绒寄甲成虫，将其在 25±1℃室内下饲养并保存，成虫用磨碎的松墨天牛幼虫饲喂，并及时补充水分。花绒寄甲的幼虫由安徽省林业科学研究院森保实验室提供的卵卡孵化而来，在使用卵卡前，首先将其放到 15℃的恒温箱中缓冲 5d，然后在 20℃恒温箱中保湿培养，时间不超过一个月；将得到的寄甲初孵幼虫接种到天牛的老熟幼虫上进行饲养。
5结果与分析
5.1 菌株的鉴定
5.1.1 菌株孢子形态特征
通过显微观察显示（图 2）：菌株 Bb3275、Bb3276 和菌株 Bb3277 的孢子近球形，单细胞，大小范围在 1.5~2.8×1.5~2.4μm。
5.2供试球孢白僵菌菌株生物学特性
5.2.1 菌落形态
供试所用的 4 株球孢白僵菌在菌落形态上有所不同。大致可分为 2 种类型：粉状型菌落和疏松型菌落（图 4）。粉状型菌落产孢早、孢子粉多，而疏松型菌落产孢少、菌丝多（表 6）。其中菌株 Bb202 和菌株 Bb3275 属于粉状型菌落，菌株 Bb3276 和菌株 Bb3277 属于疏松型菌落。
生存曲线图（图 9）及表 8 表明：两株球孢白僵菌菌株（Bb3275 和 Bb202）对松墨天牛幼虫和成虫均表现出很强的致病力，但菌株 Bb3275 对松墨天牛的致病力更高。总体而言，菌株浓度与松墨天牛的累积死亡率呈正相关。各供试菌株浓度在 1x108 孢子/mL 时，松墨天牛幼虫累积死亡率（已校正）均达到 80%以上，成虫累积死亡率（已校正）均达到 90%以上；在 1x108孢子/mL 浓度下，处理 7~9d出现死亡高峰，均达到了 50%以上；而对照组幼虫仅在 10d 后才有零星个体死亡，对照组成虫在 7d 后有零星个体死亡。
7结论
7.1 供试菌株的鉴定供试
菌株孢子近球形，单细孢，分生孢子直径大小范围在 1.5~2.8×1.5~2.4μm均符合球孢白僵菌的孢子形态特征。通过对供试菌株进行分离纯化、提取 DNA、PCR 扩增、送样测序以及测序结果的同源性比对等一系列的试验，结果显示从松墨天牛僵虫上分离纯化的菌株 Bb3275、Bb3276、Bb3277 均为球孢白僵菌。
7.2 供试球孢白僵菌株生物学特性
Bb202 和 Bb3275 为粉状型菌落，Bb3276 和 Bb3277 为疏松型菌落；Bb202菌落乳白略黄，且基质背面颜色为黄色，Bb3275 菌落为白色，基质背面为黄色，Bb3276、Bb3277 菌落成白色，基质背面颜色均为淡黄色。菌落生长速率顺序分别为 Bb3275 > Bb202 > Bb3277 > Bb3276。孢子产孢量和萌发率均是 Bb3275 最多，Bb3276 最少。
7.3 供试菌株对松墨天牛致病力分析
选择生物学性状良好的菌株 Bb202 和 Bb3275。在 4 种浓度梯度下，两株菌株侵染松墨天牛的累积死亡率随着时间的变化趋势显示，菌株的浓度越高累积死亡率越高，浓度越低累积死亡率也越低。在浓度为 1x108孢子/ml 时，菌株 Bb3275对松墨天牛幼虫和成虫的校正死亡率均较高，分别达到 91.67%和 95.83%；而在浓度为 1x104 孢子/ml 时，两株菌株均表现出较低的致病力，其中菌株 Bb202 对松墨天牛幼虫和成虫的校正死亡率最低，分别为 20.83%和 22.27%。菌株 Bb3275 对松墨天牛幼虫和成虫的最高侵染率分为 83.33%和 91.67%，最低侵染率分别为16.67%和 29.17%；菌株 Bb202 对松墨天牛幼虫和成虫的最高侵染率分为 75.00%和 83.33%，最低侵染率分别为 12.50%和 16.67%。由此看来，球孢白僵菌 Bb3275比已知优良菌株 Bb202 的致病力更高。
参考文献（略）
